Anti-KDM4B/JMJD2B-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP – O94953

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von KDM4B

• KDM4B, auch als JMJD2B oder JHDM3B bekannt, ist eine lysinspezifische Demethylase 4B und ein Mitglied der Familie der Histondemethylasen mit einer Jumonji-C-(JmjC)-Domäne (Gen KDM4B/JMJD2B). Es handelt sich um ein chromatinmodifizierendes Enzym, das die Transkription durch die Entfernung von Methylgruppen aus Histonen reguliert.
• Demethyliert spezifisch trimethyliertes Histon-H3-Lysin 9 (H3K9me3), wobei Formaldehyd und Succinat entstehen. Es wirkt nicht auf H3K4, H3K27, H3K36 oder H4K20. Im Vergleich zu anderen Mitgliedern der KDM4-Familie (KDM4A, KDM4C, KDM4D) weist KDM4B eine schwächere katalytische Aktivität gegenüber H3K9me3 auf. Verwandte Referenzen: PMID:16603238 PMID:28262558
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung des zentralen Nervensystems (ZNS), wie seine Beteiligung an neurologischen Funktionen und seine Verbindung zu verschiedenen Erkrankungen zeigen.
• Lokalisiert sich überwiegend im Zellkern, was mit seiner Funktion bei der Histonmodifikation und Chromatinregulation übereinstimmt.
• Enthält mehrere konservierte Domänen, darunter JmjC-, JmjN-, PHD-Typ-Zinkfinger- und TUDOR-Domänen, die an der Chromatinbindung und der katalytischen Aktivität beteiligt sind. Für seine Dioxygenase-Aktivität benötigt es Eisen und Zink als Kofaktoren.
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität oder Wechselwirkungen regulieren können. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Der Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 50–150 innerhalb der N-terminalen Region des humanen KDM4B entspricht. Diese Region unterscheidet sich von der katalytischen JmjC-Domäne, und der Antikörper kann mehrere Isoformen erkennen, die diese N-terminale Sequenz enthalten.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 122 kDa zu erwarten. Validieren Sie die Spezifität mithilfe geeigneter Lysate für positive und negative Kontrollen und berücksichtigen Sie die Möglichkeit, alternative Spleißvarianten nachzuweisen.
• Für Immunpräzipitation (IP) und Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) sollten Pilotversuche durchgeführt werden, um Antikörperkonzentration und Vernetzungsbedingungen zu optimieren. Verwenden Sie IgG-Isotypkontrollen und validieren Sie die Anreicherung an bekannten KDM4B-Ziel-Loci.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte die nukleäre Lokalisation überprüft werden; der Antikörper sollte überwiegend den Zellkern anfärben. Eine Ko-Färbung mit Kernmarkern kann die Spezifität bestätigen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte wurde berichtet. Bei anderen Spezies sollte vor der Anwendung die Sequenzhomologie innerhalb der Immunogenregion bestätigt werden.

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