Anti-KDM4A Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - O75164

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von KDM4A

• Lysinspezifische Demethylase 4A (KDM4A), auch bekannt als JMJD2A oder JHDM3A, ist eine Histon-Demethylase, die spezifisch trimethyliertes 'Lysin-9' (H3K9me3) und 'Lysin-36' (H3K36me3) des Histons H3 demethyliert, ohne Aktivität gegenüber mono- oder dimethylierten Resten oder gegenüber H3K4, H3K27 oder H4K20. Sie demethyliert außerdem Histon H1.4 an 'Lysin-26' (H1.4K26me1/me2/me3).
  Verwandte Referenzen: PMID:16603238, PMID:26741168, PMID:21768309, PMID:19144645, PMID:30156264
• KDM4A ist an der transkriptionellen Repression beteiligt, indem es Histondeacetylasen (HDACs) und den Korepressor NCOR1 an E2F-abhängige und ASCL2-Promotoren rekrutiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:16024779
• KDM4A ist im Zellkern lokalisiert.
• KDM4A wird ubiquitätär in allen menschlichen Geweben exprimiert.
• Das Protein gehört zur Familie der JmjC-Domänen enthaltenden Histondemethylasen und enthält Zinkfingerdomänen. Es unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, für seine Aktivität werden Eisen und Zink als Cofaktoren benötigt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 382-459 des menschlichen KDM4A, die im N-terminalen Bereich lokalisiert sind. Überprüfen Sie, ob der Antikörper sowohl die volle Länge als auch die muskelspezifische Isoform ohne die N-terminale Domäne erkennt, indem Sie Tests in relevanten Zelllysaten durchführen (z. B. Myoblasten vs. Myotuben).
• Für Western Blot ist eine Bande bei ~121 kDa für KDM4A in voller Länge zu erwarten; validieren Sie mit Kern Extrakten aus menschlichen, murinen oder Ratten-Zelllinien.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung (WB, IP, ELISA) anhand von Positivkontrollproben; führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimale Arbeitskonzentration zu ermitteln.
• Für die Immunpräzipitation ziehen Sie Vernetzungsmethoden oder direkte Protokolle in Abhängigkeit von der Antikörperisotypie und der Zielmengenhäufigkeit in Betracht.
• Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu (z. B. Isotypkontrolle, Knockout-Lysate), um die Spezifität zu bestätigen.

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