Anti-KDM1 (LSD1) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P - O60341

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von KDM1A

• KDM1A (auch bekannt als LSD1, AOF2, BHC110) ist eine FAD-abhängige lysinspezifische Histon-Demethylase, die Mono- und Dimethylierungen an Lysin 4 (H3K4me1/me2) und Lysin 9 (H3K9me1/me2) von Histon H3 entfernt. Abhängig von der Promotor-Kontext kann diese Aktivität zu transkriptioneller Repression oder Aktivierung führen. Verwandte Referenzen: PMID:15620353, PMID:15811342, PMID:16079794
• Die Demethylierung von H3K4me an Nukleosomen erfordert die Interaktion mit dem Co-Repressor RCOR1/CoREST, wodurch KDM1A an der Regulation der neuronalen Genexpression und der Funktion des REST-Komplexes beteiligt ist. Verwandte Referenzen: PMID:16079794, PMID:16140033, PMID:16885027
• In Gegenwart des Androgenrezeptors (AR) wirkt KDM1A als Koaktivator durch Demethylierung von H3K9me; diese Funktion wird durch die Phosphorylierung von Histon H3 Threonin 6 (H3T6ph) durch PRKCB moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:16079795
• KDM1A demethyliert auch nicht-histonische Substrate, darunter Lysin 370 von p53 (wodurch die Interaktion mit 53BP1 beeinträchtigt wird), DNA-Methyltransferase 1 (DNMT1) und der Transkriptionsfaktor SOX2, wodurch die Stabilität und Funktion des Proteins beeinflusst wird. Verwandte Referenzen: PMID:29691401, PMID:29358331
• Es spielt eine entscheidende Rolle in der Entwicklung, es wird für die Gastrulation benötigt und in der Hämatopoese wirkt es innerhalb eines RCOR/GFI/KDM1A/HDAC-Komplexes zur Regulation der Blutzelldifferenzierung. Verwandte Referenzen: PMID:16079794, PMID:16140033
• KDM1A fördert die Epithelial-Mesenchymale Transition (EMT) durch Zusammenarbeit mit SNAI1 zur Repression epithelialer Marker wie E-Cadherin/CDH1, CDN7 und KRT8. Verwandte Referenzen: PMID:20562920, PMID:27292636, PMID:20389281
• In Neuronen demethyliert eine gehirnangereicherte Isoform von KDM1A Histon H4 Lysin 20 (H4K20me1/me2), um aktivitätsabhängige Genexpression zu regulieren – ein Prozess, der für räumliches Lernen und Gedächtnis essenziell ist. Verwandte Referenzen: PMID:26214369
• KDM1A ist überwiegend im Zellkern lokalisiert und wird ubiquitär exprimiert, mit besonders hoher Expression im Gehirn und Hoden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für die Western Blot-Analyse beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht von KDM1A etwa 93 kDa; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und überprüfen Sie die Bandenspezifität mit Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Das Immunogen entspricht den Resten 130–380 von menschlichem KDM1A; führen Sie eine Sequenzalignment durch, um die Zielhomologie bei der Verwendung von Maus- oder Rattenproben zu bewerten, da Kreuzreaktivität angegeben ist, aber je nach Anwendung variieren kann.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) können Gewebeschnitte aus Gehirn oder Hoden aufgrund der hohen KDM1A-Expression als Positivkontrollen dienen; optimieren Sie die Antigen-Retrieval und die Verdünnung des primären Antikörpers empirisch.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) erwarten Sie eine Kernfärbung; eine korrekte Zellfixierung und Permeabilisierung sind kritisch, eine Co-Färbung mit einem Kernmarker wird empfohlen.
• Bei der Verwendung in ELISA ist die Einbeziehung von Positiv- und Negativkontrollen unerlässlich, um die Spezifität und Linearität des Antikörpers zu beurteilen.

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