Anti-KAT9/Elp3 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9H9T3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KAT9/Elp3 Funktion und Lokalisation

• KAT9/Elp3, auch bekannt als Elongator-Komplex-Protein 3 oder tRNA-Uridin(34)-Acetyltransferase, fungiert als katalytische Untereinheit des Elongator-Komplexes und vermittelt die Bildung von Carboxymethyluridin in der Wobble-Base an Position 34 in tRNAs (PubMed:29415125). Verwandte Referenzen: PMID:29415125
• Es wird für mehrere tRNA-Modifikationen benötigt, einschließlich mcm5U, mcm5s2U und ncm5U, und spielt eine zentrale Rolle bei der tRNA-Verarbeitung und der Translationsgenauigkeit.
• Während ursprünglich angenommen wurde, dass es auch als Protein-Lysin-Acetyltransferase wirkt, deuten neuere Erkenntnisse darauf hin, dass ELP3 primär als tRNA-Acetyltransferase fungiert (PubMed:29415125); es ist keine Haupt-Acetyltransferase von Tubulin (PubMed:22153374). Verwandte Referenzen: PMID:29415125 PMID:22153374
• KAT9/Elp3 ist an der Neurogenese beteiligt und reguliert die Migration und Verzweigung von Projektionsneuronen im sich entwickelnden zerebralen Kortex durch einen Prozess, der von der Alpha-Tubulin-Acetylierung abhängt (PubMed:19185337). Verwandte Referenzen: PMID:19185337
• Subzelluläre Lokalisationsstudien zeigen sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Verteilung, was mit seinen Rollen bei der tRNA-Modifikation und potenziellen nukleären Funktionen übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression wird im Kleinhirn und in spinalen Motoneuronen beobachtet, was es mit der Motoneuron-Biologie und neurodegenerativen Erkrankungen wie der amyotrophen Lateralsklerose in Verbindung bringt.
• Das Protein enthält einen Eisen-Schwefel-Cluster und bindet RNA und tRNA, wobei Schlüsselwörter seine Beteiligung an Metallbindung, S-Adenosyl-L-Methionin-abhängiger Methylierung und Neurodegeneration hervorheben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem vollständigen humanen KAT9/Elp3-Protein (Aminosäuren 1–547), was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl native als auch denaturierte Formen erkennen kann; dieses Design unterstützt Western Blot (vorhergesagte Bande ~62 kDa) und IHC-P-Anwendungen.
• Für WB validieren Sie den Antikörper in Lysaten von humanen, murinen oder Rattenzellen, von denen bekannt ist, dass sie ELP3 exprimieren (z.B. Kleinhirn- oder Motoneuron-Zelllinien); schließen Sie geeignete Ladekontrollen ein.
• Bei IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Methoden (Citrat- oder EDTA-Puffer) in Betracht gezogen und die Primärantikörper-Verdünnung optimiert werden; die bekannte Expression im Kleinhirn und Rückenmark bietet ein positives Kontrollgewebe.
• Für ELISA kann die Paarung mit einem Detektionsantikörper gegen das gleiche rekombinante Protein, das als Immunogen verwendet wurde, einen quantitativen Assay ergeben; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen sollte experimentell bestätigt werden.
• Da ELP3 ein Eisen-Schwefel-Cluster-Protein ist, vermeiden Sie reduzierende Mittel, die den Cluster stören könnten, wenn funktionelle Studien geplant sind; Standard-Reduktions-SDS-PAGE-Bedingungen sind für denaturierenden Western Blot geeignet.

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