Anti-KAT2A (GCN5) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q92830

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KAT2A-Funktion und Lokalisierung

• KAT2A ist eine vielseitige Lysin-Acyltransferase, die Acetyl-CoA, Succinyl-CoA, Glutaryl-CoA, Crotonyl-CoA und Lactoyl-CoA zur Modifikation von Histon- und Nicht-Histon-Proteinen nutzt und so ihr regulatorisches Repertoire über die klassische Acetylierung hinaus erweitert. Verwandte Referenzen: PMID:31542297 PMID:29211711 PMID:37040526 PMID:39561764
• In den SAGA- und ATAC-Komplexen fungiert KAT2A als Histon-Acetyltransferase (HAT) mit einer starken Präferenz für die Acetylierung von Histon H3 an Lys-9 (H3K9ac), was die epigenetische Transkriptionsaktivierung fördert. Es acetyliert auch H1.4K34 und die Variante H2A.Z. Verwandte Referenzen: PMID:17301242 PMID:19103755 PMID:29211711 PMID:21131905 PMID:22465951 PMID:29973595 PMID:31527837
• KAT2A vermittelt Histon-Succinylierung (H3K79succ) und Glutarylierung (H4K91glu), Modifikationen, die die Nukleosomenstabilität und Transkription beeinflussen. Die Succinylierung hängt von der Assoziation mit dem 2-Oxoglutarat-Dehydrogenase-Komplex ab. Verwandte Referenzen: PMID:29211711 PMID:31542297
• Über Histone hinaus acetyliert KAT2A wichtige regulatorische Proteine wie PPARGC1A (Unterdrückung der Gluconeogenese), TBX5 (Kontrolle des nukleo-zytoplasmatischen Shuttlings) und PLK4 (Begrenzung der Zentrosomenvermehrung), was seine Aktivität mit Stoffwechsel, Entwicklung und Zellzykluskontrolle verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:16753578 PMID:23142079 PMID:27796307 PMID:29174768
• KAT2A ist entscheidend für verschiedene Prozesse, einschließlich der Konsolidierung des Langzeitgedächtnisses, der T-Zell-Aktivierung, der kraniofazialen Entwicklung und der Pluripotenz embryonaler Stammzellen, und wirkt über gezielte Genexpressionsprogramme.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, Chromosomen, das Zytoplasma und das Zentrosom, was es KAT2A ermöglicht, Chromatin- und zytoplasmatische Ziele zu regulieren.
• KAT2A ist ubiquitär in Geweben exprimiert und interagiert auch mit dem HIV-1 Tat-Protein, um das Chromatin-Remodeling und die Transkriptionsaktiviät des Provirus zu modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (aa 1-100) von humanem KAT2A; daher kann der Antikörper die volle Länge von KAT2A und bestimmte Splice-Varianten erkennen. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem Zielgewebe oder Ihrer Zelllinie.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 94 kDa, aber posttranslationale Modifikationen (Phosphorylierung, Acetylierung) können zu Bandenverschiebungen führen. Ziehen Sie die Verwendung frischer Protease-/Phosphatase-Inhibitoren in Betracht und optimieren Sie den Gel-Prozentsatz entsprechend.
• Bei IHC-P stellen Sie eine korrekte Antigen-Demaskierung sicher (z.B. hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung mit Citratpuffer pH 6,0) und validieren Sie die Färbung mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen. Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper für Multispezies-Studien geeignet, aber überprüfen Sie ihn immer im relevanten Proben-System.
• Für IF/ICC sollten Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen optimiert werden; die Anwesenheit von KAT2A sowohl in nukleären als auch zytoplasmatischen Kompartimenten kann sorgfältige Bildgebungsparameter erfordern.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis verwendet werden; titrieren Sie den Antikörper und kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Nachweisreagenz. Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, berücksichtigen Sie sein Potenzial, mehrere Epitope zu erfassen.

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