Anti-Kallistatin (SERPINA4) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - P29622

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Kallistatin-Funktion und -Lokalisierung

• Kallistatin, auch bekannt als Serpin A4, Peptidaseinhibitor 4 (PI-4) oder Kallikrein-Inhibitor, ist ein Mitglied der Superfamilie der Serinprotease-Inhibitoren (Serpine), die vom SERPINA4-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als spezifischer Inhibitor von Gewebekallikrein und blockiert dessen amidolytische und Kininogenase-Aktivitäten. Diese Hemmung beinhaltet die Bildung eines äquimolaren, hitze- und SDS-stabilen Komplexes zwischen dem Inhibitor und dem Enzym.
• Während der Hemmung wird die reaktive Schleife von Kallistatin durch Gewebekallikrein gespalten, wobei ein kleines C-terminales Fragment entsteht. Diese Spaltung ist ein typischer Mechanismus für die Serpin-vermittelte Proteasehemmung.
• Kallistatin ist ein sezerniertes Glykoprotein, wie durch seine subzelluläre Lokalisierung (sezerniert) und die Schlüsselwort-Annotation (Glykoprotein, Signalpeptid) angezeigt wird.
• Das Protein wird vorwiegend in der Leber exprimiert und ins Plasma sezerniert, was seiner Rolle bei der Regulierung der zirkulierenden Kallikrein-Aktivität entspricht.
• Schlüsselwörter heben seine Klassifizierung als Serinprotease-Inhibitor, Glykoprotein und sezerniertes Protein hervor, mit experimentellen Belegen aus direkter Proteinsequenzierung und Proteomik-Identifizierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 178–427) deckt einen großen internen Bereich des Proteins ab und erkennt wahrscheinlich multiple Epitope. Dieses Design kann eine robuste Detektion unter denaturierenden und nativen Bedingungen ermöglichen.
• Für den Western Blot ist ein Band um 49 kDa (wie angegeben) in Proben zu erwarten, die SERPINA4 exprimieren, wie z. B. Lebergewebe oder Plasma. Validieren Sie die Spezifität mithilfe von Positivkontrollen und geeignetem Blocking.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Sie beachten, dass Kallistatin sezerniert wird, sodass die intrazelluläre Färbung begrenzt sein kann. Optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung, um zytoplasmatische Bestände oder Intermediate des Sekretionswegs zu detektieren.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper nach empirischer Optimierung der Arbeitskonzentrationen und Kombination mit geeigneten Sekundärantikörpern sowohl als Erfassungs- als auch als Nachweisreagenz verwendet werden.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf eine Nützlichkeit in Nagetiermodellen hin; validieren Sie jedoch die speziesabhängige Leistung in Ihrem experimentellen System.

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