Anti-JNK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF, IHC, ELISA - P45983

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: JNK1-Funktion und -Lokalisierung

• Die mitogenaktivierte Proteinkinase 8 (JNK1), codiert durch das MAPK8-Gen, ist eine stressaktivierte Serin/Threonin-Kinase, die als Schlüsselkomponente der c-Jun N-terminalen Kinase (JNK)-Signalkaskade fungiert. Sie ist auch als SAPK1c und JNK-46 bekannt.
• Nach Aktivierung durch duale Phosphorylierung durch die vorgelagerten Kinasen MAP2K4/MKK4 und MAP2K7/MKK7 transloziert JNK1 in den Zellkern und phosphoryliert Transkriptionsfaktoren wie c-Jun und ATF2, wodurch die AP-1-abhängige Genexpression reguliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:18307971
• JNK1 fördert die stressinduzierte Apoptose durch Phosphorylierung Schlüsselproteine, einschließlich p53 und YAP1, und verknüpft dadurch zellulären Stress mit programmiertem Zelltod. Verwandte Referenzen: PMID:21364637
• Unter Hungerbedingungen phosphoryliert JNK1 BCL2, was zu dessen Dissoziation von BECN1 und der anschließenden Aktivierung der Autophagie führt. Verwandte Referenzen: PMID:18570871
• Das JNK1-Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, um multiple Isoformen (alpha-1, alpha-2, beta-1, beta-2) zu produzieren, die unterschiedliche Bindungspräferenzen für downstream-Substrate zeigen; beispielsweise bindet beta-1 bevorzugt c-Jun, während alpha und beta-2 eine ähnliche Bindung auf niedrigem Niveau an sowohl c-Jun als auch ATF2 zeigen.
• JNK1 lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und Zellkern und wurde auch an Synapsen in neuronalen Zellen gefunden, was konsistent mit ihren Rollen in der Neuroentwicklung und synaptischen Funktion ist.
• JNK1 beteiligt sich an diversen physiologischen Prozessen, einschließlich der Regulation der zirkadianen Rhythmik durch Phosphorylierung des CLOCK-BMAL1-Komplexes, der T-Zell-Differenzierung und der neuronalen Migration. Verwandte Referenzen: PMID:22441692

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die Reste 245–345 innerhalb der Kinasedomäne von menschlichem JNK1 entworfen, einer Region, die zwischen Arten hoch konserviert ist, was die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt. Forscher können in Betracht ziehen, die Reaktivität in ihrem spezifischen Modellsystem zu verifizieren.
• Für Western Blotting wird ein vorherrschendes Band um 48 kDa erwartet. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein; Ganzzelllysate aus gestressten oder stimulierten Zellen (z. B. UV-behandelte HeLa) können das Signal aufgrund einer aktivierungsinduzierten Stabilisierung verstärken.
• Bei der Immunzytochemie/Immunfluoreszenz (IF/ICC) und der Immunhistochemie (IHC-P) werden sowohl kern- als auch zytoplasmatische Färbemuster erwartet. Für neuronale Gewebe kann auch eine synaptische Lokalisierung beobachtet werden. Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für jeden Probentyp.
• Da dieser Antikörper das gesamte JNK1 erkennt, ist für die Detektion der aktivierten (phosphorylierten) Form ein separater phosphospezifischer Antikörper erforderlich. Es wird empfohlen, parallele Blots oder Multiplex-Färbungen durchzuführen, um Aktivierungszustände zu unterscheiden.
• Für ELISA-Anwendungen kann in Betracht gezogen werden, den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz gegen rekombinantes JNK1 oder Zelllysate zu verwenden, gepaart mit einem nicht-konkurrierenden Antikörper für Sandwich-Formate.

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