Anti-JAK3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P52333

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: JAK3-Funktion und -Lokalisierung

• JAK3 (Januskinase 3) ist eine nicht-rezeptorgebundene Tyrosin-Proteinkinase, die beim Menschen durch das JAK3-Gen kodiert wird. Alternatives Spleißen erzeugt zwei Isoformen: die längere S-Form und die kürzere B-Form, die sich in ihrer Gewebeverteilung unterscheiden.
• Sie spielt eine zentrale Rolle in der Zytokin-Signaltransduktion durch Assoziation mit Typ-I-Rezeptoren, die die gemeinsame Gammakette (IL2RG) teilen, einschließlich der Rezeptoren für IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 und IL-21.
• Nach Ligandenbindung phosphoryliert JAK3 Tyrosinreste am zytoplasmatischen Ende des Rezeptors und schafft damit Andockstellen für STAT-Transkriptionsfaktoren; anschließend phosphoryliert sie STATs (z. B. STAT5A/B), die dimerisieren und in den Zellkern translozieren, um die Genexpression zu regulieren.
• JAK3 ist für sowohl die angeborene als auch die adaptive Immunität essentiell und kritisch an der T-Zell-Entwicklung und der Hämatopoese beteiligt.
• Subzellulär ist JAK3 im Zytoplasma lokalisiert und mit dem Endomembransystem assoziiert.
• Gewebeexpression: JAK3 wird in NK-Zellen und NK-ähnlichen Zelllinien nachgewiesen, jedoch nicht in ruhenden T-Zellen. Die S-Form überwiegt in hämatopoetischen Linien, während die B-Form sowohl in hämatopoetischen als auch in epithelialen Zellen gefunden wird.
• Das Protein gehört zur Proteinkinase-Superfamilie, zur Tyr-Proteinkinase-Familie und zur JAK-Unterfamilie. Es enthält eine SH2-Domäne und eine Tyrosin-Proteinkinase-Domäne.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (es ist ein Phosphoprotein). Schlüsselwörter heben auch die Beteiligung an Krankheitsvarianten und schwerer kombinierter Immundefizienz (SCID) hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 350-530 von humanem JAK3. Für den Western Blot ist ein Band bei ca. 125 kDa zu erwarten.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle in Betracht gezogen werden, die für den Nachweis zytoplasmatischer Proteine geeignet sind.
• Bei der Durchführung eines ELISA sollten geeignete Blockierungs- und Nachweissysteme verwendet werden; die Kombination mit einem anderen JAK3-Antikörper kann für Sandwich-Assays vorteilhaft sein.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Variabilität die Leistung beeinträchtigen; eine Validierung im entsprechenden Probenystem wird empfohlen.
• Beachten Sie, dass JAK3 hauptsächlich in Immunzellen exprimiert wird; positive Kontrollen könnten NK-Zelllinien oder aktivierte T-Zellen umfassen.

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