Anti-ITK/EMT monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q08881

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ITK/EMT-Funktion und -Lokalisierung

• Tyrosin-Proteinkinase ITK/TSK, auch bekannt als Interleukin-2-induzierbare T-Zell-Kinase, Kinase EMT, T-Zell-spezifische Kinase oder Tyrosin-Proteinkinase Lyk, wird vom ITK-Gen kodiert.
• Spielt eine wesentliche Rolle in der adaptiven Immunität durch Regulation der Entwicklung, Funktion und Differenzierung von konventionellen T-Zellen und nicht-konventionellen NKT-Zellen. Nach TCR-Engagement wird ITK an die Membran rekrutiert, durch LCK phosphoryliert und autophosphoryliert, um vollständig aktiv zu werden.
• Sobald aktiviert, phosphoryliert ITK PLCG1, was zur Kalziumfreisetzung und zum nukleären Translokation von NFAT führt, und phosphoryliert Adapterproteine LAT und LCP2, was letztendlich die Lymphokinproduktion, T-Zell-Proliferation und Differenzierung antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:12186560, PMID:12682224, PMID:21725281
• Lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern.
• Wird in T-Zell-Linien und natürlichen Killerzell-Linien exprimiert.
• Phosphoryliert TBX21 an Tyr-530 und vermittelt dessen Interaktion mit GATA3; auch an der Kalziumreaktion von Gamma-Delta-T-Zellen und der transkriptomischen Modulation beteiligt.
• Enthält SH2-, SH3- und Kinase-Domänen mit einem Zinkfinger-Motiv; klassifiziert als Tyrosin-Proteinkinase mit ATP-Bindungs- und Metallbindungseigenschaften.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot sollten Sie Vollzelllysate aus humanen T-Zell-Linien (z. B. Jurkat) verwenden, um den ~72 kDa-Band nachzuweisen.
• Für ELISA validieren Sie mit rekombinantem ITK-Protein oder Zelllysaten, um die Bindungsspezifität zu bewerten; fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Da das Immunogen ein vollständiges rekombinantes Protein ist, erkennt der Antikörper möglicherweise mehrere Epitope; bestätigen Sie die Spezifität mittels Knockout- oder Knockdown-Modellen.
• Stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung Protease- und Phosphatase-Inhibitoren enthält, um den Phosphorylierungszustand und die Proteinintegrität zu bewahren.

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