Anti-ITIH3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q06033

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ITIH3-Funktion und -Lokalisierung

• ITIH3 (Inter-alpha-Trypsin-Inhibitor-Schwerkette H3) ist auch als Serum-verwandtes Hyaluronan-assoziiertes Protein (SHAP) bekannt und wird vom ITIH3-Gen kodiert. Es gehört zur Inter-alpha-Trypsin-Inhibitor (ITI)-Familie.
• ITIH3 kann als Träger von Hyaluronan (HA) im Serum oder als Bindungsprotein fungieren, das HA mit anderen Matrixproteinen, einschließlich Zelloberflächenproteinen, verbindet, wodurch die HA-Lokalisierung, -Synthese und -Abbau reguliert werden – Prozesse, die für die Zellmigration und Geweberemodellierung entscheidend sind.
• Das Protein wird sezerniert und enthält Schwerketten-Domänen, die eine kovalente Bindung an Hyaluronan über eine Serin-Ester-Bindung ermöglichen, wodurch kovalente Komplexe mit HA gebildet werden.
• ITIH3 wird als Mitglied der Serinprotease-Inhibitor (Serpin)-Familie klassifiziert, obwohl seine Hauptrolle eher in der Organisation der extrazellulären Matrix als in der Proteasehemmung liegt; es weist ein Signalpeptid und mehrere Glykosylierungsstellen auf.
• Alternatives Spleißen von ITIH3 erzeugt mehrere Isoformen, die möglicherweise eine unterschiedliche Gewebeverteilung und funktionelle Eigenschaften haben.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen gehört die N-verknüpfte Glykosylierung, die die Protein-Stabilität und -Funktion beeinflusst.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~99,8 kDa, was mit dem beobachteten ~100 kDa-Band im Western Blot übereinstimmt; es wird in der Leber exprimiert und in das Plasma sezerniert, mit einer breiten Gewebeverteilung aufgrund seiner Rolle im Hyaluronan-Stoffwechsel.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 35-180 von humanem ITIH3 (NP_002208.3), eine Region, die wahrscheinlich über Spezies hinweg konserviert ist, was die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) sollte ein Startverdünnungsbereich von 1:500–1:2000 in Betracht gezogen werden, obwohl die optimale Verdünnung empirisch im jeweiligen Zielproben-System bestimmt werden sollte. Ein Band nahe 100 kDa wird erwartet; zusätzliche Bänder können Isoformen oder Komplexe widerspiegeln.
• Für ELISA kann der Antikörper als Nachweis- oder Capture-Reagenz verwendet werden; titrieren Sie, um Arbeitskonzentrationen für direkte oder Sandwich-Formate zu ermitteln.
• Da ITIH3 ein sezerniertes Protein ist, können Serum, Plasma oder Zellkultur-Überstände geeignete Probentypen sein. Vorreinigungsschritte oder Anreicherungsschritte können die Detektion verbessern.
• Validieren Sie die Leistung des Antikörpers in der spezifischen Anwendung und der gewünschten Spezies mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.

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