Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ITGAE

• Integrin alpha-E (ITGAE), auch bekannt als CD103, HML-1-Antigen oder mukosales Lymphozyten-1-Antigen, ist eine transmembranöse Integrin-alpha-Kette, die sich mit Integrin beta-7 (ITGB7) zum Heterodimer alpha-E/beta-7 verbindet. Dieser Rezeptor bindet spezifisch E-Cadherin und erleichtert die Adhäsion von T-Lymphozyten an Epithelzellen.
• ITGAE gehört zur Familie der Integrin-alpha-Ketten, die sich durch extrazelläre ligandenbindende I-Domänen und intrazelluläre Signalmotive auszeichnet. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Mukosaimmunität, indem es die Retention und Aktivierung von intraepithelialen Lymphozyten vermittelt.
• Das Protein ist ein durchgangiger Typ-I-Membranprotein mit einer großen extrazellulären Domäne, die mehrere strukturelle Wiederholungen enthält, und einem kurzen zytoplasmatischen Schwanz. Es wird überwiegend auf intraepithelialen T-Lymphozyten exprimiert, die zwischen mukosalen Epithelzellen liegen.
• ITGAE durchläuft posttranslationale Modifikationen einschließlich N-gebundener Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die für die korrekte Faltung und die Heterodimerbildung unerlässlich sind. Es enthält außerdem kalziumbindende Stellen in seinen extrazellulären Regionen, die für die Ligandenbindung entscheidend sind.
• Die durch die Integrin ITGAE/ITGB7 vermittelte Adhäsion an E-Cadherin ist für die Immunüberwachung und Barrierefunktion in Epithelgeweben wie dem Gastrointestinaltrakt, Atemtrakt und Geschlechtsorganen unerlässlich. Diese Interaktion erleichtert den crosstalk zwischen Lymphozyten und Epithelzellen und wird mit Entzündungskrankheiten und epithelialen Malignomen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen extrazellulären Domäne (AS 19-200), die über Spezies hinweg relativ konserviert ist; daher kann dieser Antikörper menschliches, Maus- und Ratten-ITGAE in Western Blot- und ELISA-Anwendungen nachweisen.
• Für den Western Blot ist eine Bande von etwa 130 kDa in Zell- oder Gewebslysaten zu erwarten, die CD103 exprimieren, wie intestinale intraepitheliale Lymphozyten oder bestimmte T-Zelllinien. Erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen, um das Glykoprotein aufzutrennen.
• Im ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von rekombinantem oder nativem ITGAE verwendet werden; kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Sekundärantikörper und kontrollieren Sie unspezifische Bindung durch die Einbeziehung einer Negativkontrollvertiefung.
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• Da ITGAE spezifisch auf intraepithelialen T-Zellen exprimiert wird, überprüfen Sie die Expression in Ihrem Probenystem mit einer Positivkontrolle wie menschlicher Darmschleimhaut oder aktivierten Lymphozyten. Für die Kreuzreaktivität in Maus-/Rattengeweben validieren Sie mit Lysaten aus Darmepithel.

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