Anti-ITCH Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q96J02

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ITCH-Funktion und -Lokalisierung

• ITCH (E3-Ubiquitin-Protein-Ligase Itchy-Homolog, auch bekannt als AIP4, AIF4, ADMFD, NAPP1) ist eine HECT-Domain-enthaltende E3-Ligase, die Ubiquitin von E2-Enzymen akzeptiert und direkt auf Substratproteine überträgt. Verwandte Referenzen: PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Es katalysiert die Lys-29-, Lys-48- und Lys-63-verknüpfte Polyubiquitin-Konjugation, die für die Kontrolle entzündlicher Signalwege entscheidend ist; als Teil eines Ubiquitin-Editierungskomplexes mit TNFAIP3, TAX1BP1 und RNF11 sorgt ITCH durch Vermittlung des RIPK1-Abbaus für eine transiente NF-kappa-B-Aktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• ITCH reguliert die transkriptionelle Aktivität mehrerer Faktoren (z. B. JUN, JUNB, NFE2) und Immunreaktionsmoleküle (z. B. MAVS, RIPK2) durch Ubiquitinierung und beeinflusst die Th2-Zytokinproduktion, die hämatopoetische Entwicklung und die antivirale Signalgebung. Verwandte Referenzen: PMID:16387660, PMID:18718448, PMID:19592251, PMID:19881509
• Lokalisiert in der Zellmembran, dem Zytoplasma, dem Zellkern und den endosomalen Membranen, vermittelt ITCH das Receptor-Sorting (z. B. CXCR4, FZD4), indem es ESCRT-0-Komponenten und PI4K2A ubiquitiniert und somit die Ubiquitinierung mit dem endozytären Transport verknüpft. Verwandte Referenzen: PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• ITCH fördert die Apoptose und das Redox-Gleichgewicht, indem es TXNIP zusammen mit UBR5 für eine verzweigte Ubiquitinierung anzielt, und vermittelt die anti-apoptotische EGF-Signalgebung über den Abbau von p15 BID. Verwandte Referenzen: PMID:20068034, PMID:20392206, PMID:29378950
• Es hemmt die Replikation des Influenza-A-Virus, indem es die Lys-48-verknüpfte Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau des viralen M1-Proteins katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:30328013
• ITCH ist weit verbreitet exprimiert und unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und alternatives Spleißen mit einem Molekulargewicht von ca. 103 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen dem N-terminalen Bereich (aa 1-155) von humanem ITCH entspricht, ist dieser polyklonale Antikörper wahrscheinlich in der Lage, vollständiges ITCH (~103 kDa) sowie potenzielle Isoformen in Lysaten von Mensch, Maus und Ratte zu erkennen.
• Für WB sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden und die Bandspezifität mit positiven Kontrollzelllinien (z. B. Jurkat, HeLa) und einer negativen Kontrolle (siRNA-Knockdown) validiert werden.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Methoden und die Antikörperverdünnung unter Verwendung von Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie ITCH exprimieren.
• Im ELISA testen Sie direkte oder Capture-Formate und bestätigen die Reaktivität mit rekombinantem ITCH-Protein.
• Fügen Sie immer geeignete Kontrollen hinzu, die auf Ihr experimentelles System zugeschnitten sind.

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