Anti-Islet1 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P61371

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Islet1

• Islet1 (ISL1) ist ein DNA-bindender Transkriptionsaktivator, der das konsensus Oktamer-Motiv 5'-ATAATTAA-3' in Promotoren von Zielgenen erkennt und eine zentrale Rolle in genregulatorischen Netzwerken spielt.
• Es ist essenziell für die Differenzierung von retinalen Ganglienzellen, wo es mit POU4F2 kooperiert, um eine maximale Expression von RGC-Zielgenen zu erreichen.
• Gemeinsam mit LHX3 und LDB1 ist Islet1 an der Spezifizierung von Motorneuronen beteiligt.
• Es bindet an Enhancer-Sequenzen des Insulingen und trägt (durch Ähnlichkeit) zur Entwicklung von pankreatischen Inselzellen bei.
• Islet1 ist ein kritischer Faktor bei der Herzentwicklung: Es markiert eine Vorläuferzellpopulation, die zum Ausflusstrakt, rechten Ventrikel und atrialen Zellen beiträgt, und ist für die Migration und Proliferation kardialer Vorläuferzellen über die Regulation von FGF- und BMP-Wachstumsfaktoren erforderlich.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nuklear.
• Es wird in Subpopulationen von Neuronen (Nebenniermark, Rückenmarksganglien), der inneren nuklearen Schicht und Ganglienzellschicht der Retina, der Zirbeldrüse und spezifischen Hirnregionen exprimiert.
• Gehört zur Familie der LIM-Homöodomänen-Proteine; enthält zwei N-terminale LIM-Domänen (zinkbindend) und eine Homöobox-DNA-Bindedomäne. Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen liegt in einer zentralen Region (aa 200-300) von humanem Islet1, die bei Mäusen gut konserviert ist – dies unterstützt die beobachtete Kreuzreaktivität; diese Sequenz ist auch in bekannten Isoformen vorhanden, sodass der Antikörper multiple Spleißvarianten erkennen kann, sofern diese exprimiert werden.
• Für Western Blot (WB) ist eine Hauptbande um 39 kDa zu erwarten; reduzierende Bedingungen und standard SDS-PAGE sind geeignet.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) wird eine nukleare Färbung erwartet; es wird empfohlen, Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzeinduzierte Epitop-Retrieval bei pH 6 oder 9) vorab zu testen und den Antikörper zu titrieren.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl für den direkten als auch indirekten Nachweis des immunisierenden Peptids oder des Vollängenproteins verwendet werden; ziehen Sie die Paarung mit einem geeigneten Sekundärantikörper in Betracht.
• Aufgrund der entwicklungs- und gewebespezifischen Eigenschaften von Islet1 wird die Validierung der Spezifität an relevanten Positivkontrollen (z. B. retinale oder kardiale Gewebe, Motorneuron-Kulturen) und Negativkontrollen (Islet1 Knockout/Knockdown) empfohlen.

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