Anti-IRS2 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y4H2

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: IRS2-Funktion und Lokalisierung

• IRS2 (Insulin receptor substrate 2) ist ein Signaladapterprotein, das die Signaltransduktion vom Insulinrezeptor (INSR) und dem Insulin-like Growth Factor I Receptor (IGF1R) vermittelt und eine entscheidende Rolle bei Entwicklung, Wachstum, Glukosehomöostase und Lipidstoffwechsel spielt. Zugehörige Referenzen: PMID:25879670, PMID:24616100
• Nach der Phosphorylierung durch den Insulinrezeptor dient IRS2 als Andockgerüst für SH2-Domänen-haltige Proteine, einschließlich der regulatorischen p85-Untereinheit von PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 und SHP2, die für die nachgeschaltete Signalisierung essenziell sind. Zugehörige Referenzen: PMID:15316008, PMID:19109239
• IRS2 aktiviert den PI3K/AKT-Signalweg, der die meisten metabolischen Wirkungen von Insulin vermittelt, sowie die Ras/Raf/MEK/MAPK-Kaskade, die die Genexpression und, in Zusammenarbeit mit PI3K, das Zellwachstum und die Zelldifferenzierung reguliert.
• IRS2 reguliert den Wnt/β-Catenin-Signalweg positiv, indem es den durch Autophagie vermittelten Abbau von DVL2 unterdrückt, was zu einer verstärkten Zellproliferation führt. Zugehörige Referenzen: PMID:24616100
• IRS2 trägt zum Fortschreiten des Zellzyklus bei, indem es einen robusten Spindel-Assembly-Checkpoint (SAC) während der M-Phase fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:32554797
• In Makrophagen führt die Interleukin-4 (IL4)-induzierte Tyrosinphosphorylierung von IRS2 zur Rekrutierung und Aktivierung der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K), was seine Rolle bei der Immun-Signalisierung unterstreicht. Zugehörige Referenzen: PMID:19109239
• IRS2 ist überwiegend im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert.
• Posttranslationale Modifikationen von IRS2 umfassen Phosphorylierung, Methylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation, die seine Aktivität und Stabilität modulieren. Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Methylierung, Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1238–1338 nahe dem C-Terminus des humanen IRS2. Diese Region ist speziesübergreifend gut konserviert, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte übereinstimmt.
• Für den Western Blot (WB) hat IRS2 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 137 kDa. Verwenden Sie ein Polyacrylamid-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und verlängerte Transferzeiten, um einen effizienten Transfer von Proteinen mit hohem Molekulargewicht sicherzustellen.
• Überprüfen Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) die Antikörperspezifität mithilfe geeigneter Kontrollen, da polyklonale Antikörper unspezifische Bindungen aufweisen können.
• Optimieren Sie für ELISA die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen mit rekombinantem IRS2-Protein oder Zelllysaten, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Da es sich um einen in Kaninchen produzierten polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Isoformen oder Abbauprodukte erkennen; bestätigen Sie das erwartete Bandenmuster in Ihrem spezifischen Probensystem.

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