Anti-IRS2 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y4H2

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von IRS2

• IRS2 (Insulinrezeptorsubstrat 2) ist ein signalübertragendes Adapterprotein, das die Signaltransduktion vom Insulinrezeptor (INSR) und dem Rezeptor für insulinähnlichen Wachstumsfaktor I (IGF1R) vermittelt. Es spielt eine entscheidende Rolle bei Entwicklung, Wachstum, Glukosehomöostase und Lipidstoffwechsel. Verwandte Referenzen: PMID:24616100
• Nach Phosphorylierung durch den Insulinrezeptor fungiert IRS2 als Gerüst, das SH2-Domänen enthaltende Proteine einschließlich der p85-Regulierungsuntereinheit von PI3K rekrutiert. Dies führt zur Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs, der für die meisten metabolischen Wirkungen von Insulin verantwortlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:25879670
• Die Rekrutierung von GRB2 durch IRS2 löst die Ras/Raf/MEK/MAPK-Signalkaskade aus, die an der Regulation von Genexpression, Zellwachstum und Differenzierung beteiligt ist.
• IRS2 wirkt außerdem als positiver Regulator des Wnt/β-Catenin-Signalwegs, indem es den Autophagie-vermittelten Abbau von DVL2 hemmt und dadurch die Zellproliferation fördert. Verwandte Referenzen: PMID:24616100
• Während der M-Phase trägt IRS2 durch Förderung eines robusten Spindelkontrollpunkts (SAC) zum Zellzyklusfortschritt bei. Verwandte Referenzen: PMID:32554797
• In Makrophagen führt die IL4-induzierte Tyrosinphosphorylierung von IRS2 zur Rekrutierung und Aktivierung der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K), wodurch es mit der Immunsignalgebung verbunden ist. Verwandte Referenzen: PMID:19109239
• IRS2 ist überwiegend im Zytoplasma (Zytosol) lokalisiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, was seine dynamische Regulation widerspiegelt.
• Als Referenz-Proteomprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 137 kDa ist IRS2 ein zentraler Signalgeber im Insulin- und Wachstumsfaktorsignalweg.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid vom C-Terminus von humanem IRS2 (AS 1239-1338). Für Western Blot sollten Sie den Antikörper an Ganzzelllysaten aus IRS2-exprimierenden Zelllinien (z. B. HepG2, HEK293) testen und mit einer geeigneten Beladungskontrolle validieren. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~137 kDa; stellen Sie sicher, dass Sie eine passende Gelprozentzahl für die Trennung verwenden.
• Für Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da IRS2 zytosolisch ist. Führen Sie einen Permeabilisierungsschritt durch (z. B. 0,1 % Triton X-100) und schließen Sie geeignete Negativkontrollen ein.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die Kombination mit einem validierten Fang-/Nachweisantikörper die Sensitivität erhöhen; erwägen Sie Schachbrett-Titrationen, um optimale Antikörperkonzentrationen und Beschichtungsbedingungen zu bestimmen.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-IRS2 ist angegeben; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem mit Gewebe- oder Zellextrakten vor Großversuchen.

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