Anti-IRS1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P35569

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IRS1-Funktion und -Lokalisierung

• Insulin-Rezeptor-Substrat 1 (IRS1) ist ein Signaladapterprotein, das die Signaltransduktion vom Insulinrezeptor (INSR) und dem Insulin-like Growth Factor I Rezeptor (IGF1R) vermittelt und eine zentrale Rolle bei Entwicklung, Wachstum, Glukosehomöostase und Lipidstoffwechsel spielt. Verwandte Referenzen: PMID:7526222
• Nach Phosphorylierung durch den aktivierten Insulinrezeptor dient IRS1 als Gerüst für SH2-Domänen enthaltende Proteine wie die regulatorische p85-Untereinheit der PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 oder SHP2, was diverse Downstream-Kaskaden einleitet.
• Die Rekrutierung von GRB2 aktiviert die Ras/Raf/MEK/MAPK-Signalkaskade, die die Genexpression reguliert und mit dem PI3K-Weg zusammenarbeitet, um das Zellwachstum und die Differenzierung zu steuern.
• Die Aktivierung des PI3K/AKT-Wegs ist für die meisten metabolischen Wirkungen von Insulin verantwortlich, einschließlich Glukoseaufnahme und Glykogensynthese.
• IRS1 reguliert den Wnt/Beta-Catenin-Signalweg positiv, indem es die Autophagie-vermittelte Degradation von DVL2 unterdrückt und so die Zellproliferation fördert.
• Subzellulär lokalisiert sich IRS1 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was seiner Rolle bei der Signalweiterleitung und der transkriptionellen Regulation entspricht.
• Ein gewebespezifischer Ausdruck wurde in Osteoblasten, jedoch nicht in Osteoklasten dokumentiert, was auf eine Rolle im Knochenstoffwechsel hindeutet.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung an mehreren Tyrosin- sowie Serin/Threoninresten sowie Ubiquitinierung und S-Nitrosylierung, die seine Aktivität und Stabilität modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich innerhalb der Aminosäuren 1134-1233 von Maus-IRS1; berücksichtigen Sie daher die Überprüfung der Detektion von Volllängen- und potenziell truncierten Isoformen in Ihrem Probensystem.
• Für den Western Blot beachten Sie das hohe vorhergesagte Molekulargewicht (~131 kDa); die Standardtransferbedingungen müssen möglicherweise optimiert werden, und Gradientengele könnten die Auflösung verbessern.
• Validieren Sie die Reaktivität des Antikörpers in Ihren spezifischen Mausgewebe- oder Zelllysaten, da eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies nicht angegeben ist.
• Bei ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen oder das Capture-Format mit der polyklonalen Natur des Antikörpers kompatibel ist, und erwägen Sie eine Blockierung, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Variabilität bei der Einrichtung langfristiger Assays bewertet werden.

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