Anti-IRF3 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q14653

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IRF3-Funktion und Lokalisierung

• IRF3 ist ein wichtiger transkriptioneller Regulator von Typ-I-Interferon (IFN)-abhängigen Immunantworten und spielt eine entscheidende Rolle in der angeborenen Immunität gegen DNA- und RNA-Viren. Verwandte Referenzen: PMID:22394562, PMID:24049179, PMID:25636800
• Es reguliert die Transkription von Typ-I-IFN-Genen (IFN-alpha und IFN-beta) und IFN-stimulierten Genen (ISG) durch Bindung an ein Interferon-stimuliertes Response-Element (ISRE) in deren Promotoren. Verwandte Referenzen: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567
• IRF3 ist ein potenterer Aktivator des IFN-beta (IFNB)-Gens als des IFN-alpha (IFNA)-Gens und spielt eine kritische Rolle sowohl in der frühen als auch in der späten Phase der IFNA/B-Geninduktion. Verwandte Referenzen: PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431
• Befindet sich in inaktiver Form im Zytoplasma nicht infizierter Zellen; nach Virusinfektion, doppelsträngiger RNA (dsRNA) oder Toll-like-Rezeptor (TLR)-Signalgebung wird es durch IKBKE- und TBK1-Kinasen phosphoryliert, was eine Konformationsänderung induziert, die zur Dimerisierung und nukleären Lokalisierung führt. Verwandte Referenzen: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953
• Im Zellkern assoziiert IRF3 mit dem CREB-Bindungsprotein (CREBBP), um den dsRNA-aktivierten Faktor 1 (DRAF1) zu bilden, einen Komplex, der die Transkription von Typ-I-IFN- und ISG-Genen aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:16154084, PMID:27302953, PMID:33440148
• Als Reaktion auf eine Sendai-Virusinfektion wird IRF3 zum Mitochondrium rekrutiert und bildet einen Apoptosekomplex TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, der Apoptose induziert. Verwandte Referenzen: PMID:25609812
• Konstitutiv in einer Vielzahl von Geweben exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (kritisch für die Aktivierung), Acetylierung und Ubiquitinierung; alternatives Spleißen erzeugt zusätzliche Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 100–200 des humanen IRF3 (NP_001184051.1), einer Region innerhalb der N-terminalen DNA-Bindedomäne; ziehen Sie die Verwendung dieser Region für Epitop-Kartierung oder Blockierungsexperimente in Betracht.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 47 kDa zu erwarten; validieren Sie dies in relevanten virusinfizierten oder IFN-stimulierten Zelllinien, um die Expression zu bestätigen.
• Es wird über Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-IRF3 berichtet; überprüfen Sie die Sequenzhomologie in der Immunogenregion, wenn Sie diese Spezies verwenden.
• Für ChIP-Anwendungen optimieren Sie die Vernetzungs- und Sonikationsbedingungen aufgrund des dynamischen nukleo-zytoplasmatischen Shuttlings von IRF3.
• Für IF/ICC verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden, um sowohl die zytoplasmatische als auch die nukleäre Lokalisierung nachzuweisen.

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