Anti-IRAK1 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P51617

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IRAK1

• IRAK1 (Interleukin-1-Rezeptor-assoziierte Kinase 1) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die für die Einleitung angeborener Immunantworten essenziell ist und als zentraler Mediator in den Signalwegen von Toll-ähnlichen Rezeptoren (TLR) und IL-1-Rezeptoren wirkt.
• Nach TLR/IL-1R-Aktivierung wird IRAK1 schnell von MYD88 rekrutiert, von IRAK4 phosphoryliert und unterliegt einer Autophosphorylierung, die nachgeschaltete Signalisierungsereignisse auslöst.
• IRAK1 phosphoryliert Pellino-E3-Ubiquitin-Ligasen (PELI1, PELI2, PELI3), was die Polyubiquitinierung von IRAK1 selbst fördert und zur Rekrutierung des IKK-Komplexes und anschließender nukleärer Translokation von NF-kB führt.
• Es phosphoryliert auch TIRAP, um dessen Ubiquitinierung und Degradation zu fördern, und phosphoryliert IRF7 direkt, um die Produktion von Typ-I-Interferon anzuregen, wodurch ein antiviral Zustand etabliert wird.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellkern und Lipidtröpfchen; die Sumoylierung von IRAK1 erleichtert die nukleäre Translokation, wo es STAT3 phosphoryliert.
• Es gibt zwei Hauptisoformen: Isoform 1 ist stärker exprimiert als Isoform 2, beide sind ubiquitär in menschlichen Geweben vorhanden.
• IRAK1 ist an Wirts-Virus-Interaktionen beteiligt und unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Sumoylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 424-633 des humanen IRAK1, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot empfehlen sich Ganzzelllysate von TLR/IL-1R-stimulierten Immunzellen (z. B. THP-1, RAW264.7), um aktivierungsabhängige Banden nahe 77 kDa nachzuweisen; die basale Expression kann variieren.
• Bei IF/ICC-Experimenten optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen; endogenes IRAK1 kann je nach Zelltyp und Stimulation sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert sein.
• Für ELISA kann die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper (z. B. gegen ein anderes Epitop) die Sensitivität verbessern; validieren Sie den Assay in der relevanten Probenmatrix.
• Als polyklonaler Antikörper kann eine Chargenvariabilität auftreten; fügen Sie daher bei jedem Versuch positive (z. B. stimulierte Zellen) und negative Kontrollen hinzu.

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