Anti-Involucrin Kaninchen Monoklonaler Antikörper für WB - P07476

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Involucrin-Funktion und -Lokalisation

• Involucrin ist eine Hauptkomponente der cornified cell envelope (CE), einer unlöslichen Struktur, die sich unterhalb der Plasmamembran terminal differenzierter Keratinozyten in geschichtetem Plattenepithel bildet.
• Das Protein ist reich an Glutamin- und Lysinresten, die als Substrate für transglutaminase-vermittelte Vernetzungen dienen und die CE an intrazelluläre Strukturproteine binden.
• Involucrin fungiert als frühes Gerüst beim CE-Aufbau und bietet eine Vorlage für die sequenzielle Anlagerung anderer Vorläufer wie Loricrin und SPRRs.
• Kodiert durch das IVL-Gen, gehört es zu einer Familie von Hüllenvorläuferproteinen, die für die mechanische und chemische Barriere der Epidermis entscheidend sind.
• Subzellulär ist Involucrin während der frühen Differenzierung zytoplasmatisch und wird während der terminalen Keratinisierung schnell an der Plasmamembran vernetzt.
• Die Expression ist streng auf suprabasale Keratinozyten der Epidermis und anderes geschichtetes Plattenepithel, einschließlich oraler, ösophagealer und zervikaler Schleimhaut, beschränkt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen transglutaminase-katalysierte Isopeptidbindungen und Lipidierung, die beide für die Unlöslichkeit der Hülle essenziell sind.
• Das Protein wird unter den UniProt-Keywords klassifiziert: Zytoplasma, Direkte Proteinsequenzierung, Isopeptidbindung, Keratinisierung, Lipoprotein, Proteomik-Identifikation, Referenzproteom, Wiederholung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 100–200 von humanem Involucrin, einer Region, die im nativen Protein wahrscheinlich solventexponiert ist; ziehen Sie bei IHC die Antigen-Demaskierung in Betracht, um vernetzte Epitope freizulegen.
• Für Western Blot kann die beobachtete Bande bei etwa 68 kDa erscheinen, beachten Sie jedoch, dass Involucrin aufgrund von Vernetzung hochmolekulare Aggregate bilden kann; reduzierende Bedingungen und frische Lysate werden empfohlen.
• Die ELISA-Leistung kann durch eine Peptid-Beschichtungsstrategie verbessert werden, die das lineare Immunogen nachahmt; kombinieren Sie dies für einen Sandwich-Assay mit einem Detektionsantikörper, der ein anderes Epitop erkennt.
• Es wird Kreuzreaktivität mit Ratte beobachtet; validieren Sie im beabsichtigten Gewebe- und Spezieskontext, da die Epitopkonservierung variieren kann.
• Bei IHC-P ist eine Involucrin-Färbung in den oberen Stachelzell- und Granularschichten der Epidermis zu erwarten; verwenden Sie geeignete positive (Haut, Mundschleimhaut) und negative (nicht-verhornendes Epithel) Kontrollen.

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