Monoklonaler Anti-Integrin-alpha-4-(ITGA4/CD49d)-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P13612

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Integrin alpha-4

• Integrin alpha-4 (ITGA4, CD49d) bildet Heterodimere mit Integrin beta-1 (ITGB1) zu VLA-4 und mit Integrin beta-7 zu LPAM-1 und fungiert als Rezeptor für Fibronectin, VCAM1 und MADCAM1.
• Über VLA-4 erkennt ITGA4 die Q-I-D-S-Sequenz in VCAM1, während alpha-4/beta-7 die L-D-T-Sequenz in MADCAM1 erkennt und dadurch das Rollen, die feste Adhäsion und die Transmigration von Leukozyten vermittelt.
• ITGA4:ITGB1 bindet an Fraktalkin (CX3CL1) und kann als Korezeptor bei der CX3CR1-abhängigen Signalübertragung fungieren. Zugehörige Referenzen: PMID:23125415
• ITGA4:ITGB1 bindet über eine separate Bindungsstelle an PLA2G2A und induziert Konformationsänderungen des Integrins, die die Ligandenbindung verstärken. Zugehörige Referenzen: PMID:18635536, PMID:25398877
• In vaskulären glatten Muskelzellen unterdrückt ITGA4:ITGB1 über die Interaktion mit SVEP1 den PRKCA-vermittelten Einstrom durch L-Typ-spannungsgesteuerte Ca2+-Kanäle sowie die ROCK-vermittelte Kalziumempfindlichkeit und hemmt dadurch die Vasokonstriktion. Zugehörige Referenzen: PMID:35802072
• ITGA4 wird auf den meisten Leukozyten exprimiert und ist entscheidend für den Transport von Immunzellen. Außerdem wird es auf Proteinebene in vaskulären glatten Muskelzellen exprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich an der Plasmamembran, wo das Protein als Typ-I-Einfachpass-Transmembranprotein vorliegt.
• Zu den Schlüsselwörtern gehören alternatives Spleißen, Zelladhäsion, Integrin, Rezeptor, Kalzium, Metallbindung, Phosphoprotein, Glykoprotein und Disulfidbindung, wodurch seine Funktionen und Regulation hervorgehoben werden.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Da sich das Immunogen über die C-terminale Region (AS 933-1032) erstreckt, wird erwartet, dass der Antikörper im WB das vollständige Integrin-alpha-4-Protein (~115 kDa) erkennt. Validieren Sie die Bandengröße mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern und Beladungskontrollen.
• Für IHC-P empfehlen wir, Standardmethoden zur Antigenrückgewinnung (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) zu testen und die Fixierungsprotokolle zu optimieren, um Membranepitope zu erhalten.
• Verwenden Sie den Antikörper im ELISA zusammen mit einem geeigneten Fang-/Detektionsantikörper und bestätigen Sie die Spezifität mithilfe von rekombinantem ITGA4-Protein oder Zelllysaten.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus kann dieser Antikörper für Untersuchungen von Mausgewebe in Betracht gezogen werden. Wir empfehlen jedoch Pilotversuche, um die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem zu bestätigen.
• Da Integrine glykosyliert sein und Disulfidbindungen bilden können, sollten Sie im WB reduzierende und nicht reduzierende Bedingungen berücksichtigen, um eine mögliche Dimerisierung zu untersuchen.

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