Polyklonaler Anti-Insulin-Rezeptor-Antikörper für WB, ELISA – P06213

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Insulinrezeptors

• Der Insulinrezeptor (IR) ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die die pleiotropen Wirkungen von Insulin vermittelt, einschließlich der Regulation der Glukoseaufnahme, des Zellwachstums und der Zelldifferenzierung.
• Nach der Insulinbindung phosphoryliert der IR die Insulinrezeptor-Substrate (IRS1–4) und SHC und aktiviert dadurch den PI3K-AKT-Signalweg für metabolische Effekte sowie den Ras-MAPK-Signalweg für die Genexpression und das Zellwachstum.
• Der IR liegt aufgrund alternativen Spleißens in zwei Isoformen (Long und Short) vor; die Short-Isoform weist eine höhere Affinität zu IGF2 auf, und Hybridrezeptoren mit IGF1R zeigen eine unterschiedliche Ligandensensitivität. Zugehörige Referenzen: PMID:12138094 PMID:16831875
• Der Rezeptor befindet sich in der Zellmembran und wird nach seiner Aktivierung in späte Endosomen und Lysosomen internalisiert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Autophosphorylierung, Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung; es handelt sich um ein Glykoprotein mit Tyrosinkinaseaktivität.
• Der Rezeptor wird hauptsächlich in insulinresponsiven Geweben (Leber, Fettgewebe, Skelettmuskulatur), aber auch in vielen anderen Geweben exprimiert; eine Überexpression wird in verschiedenen Tumoren beobachtet.
• Mutationen in INSR stehen mit Diabetes mellitus und schweren Insulinresistenzsyndromen in Zusammenhang.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Beim Western Blot ist zu berücksichtigen, dass der Insulinrezeptor in α- (~135 kDa) und β- (~95 kDa) Untereinheiten prozessiert wird, was abhängig von den reduzierenden Bedingungen und der Probenvorbereitung zu mehreren Banden führen kann.
• Validieren Sie die Reaktivität des Antikörpers in Ihrem spezifischen Probentyp (z. B. Zelllysaten oder Gewebeextrakten) unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen, da das vorhergesagte Molekulargewicht des unverarbeiteten Vorläufers bei etwa 156 kDa liegt.
• Für den ELISA titrieren Sie den Antikörper gegen rekombinanten Insulinrezeptor oder den nativen Rezeptor, um die Arbeitskonzentrationen zu optimieren, und beziehen Sie, wie angegeben, eine Validierung der Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben ein.
• Da es sich beim Immunogen um ein rekombinantes Fragment (AS 475–570) handelt, kann der Antikörper sowohl Vorläufer- als auch prozessierte Formen erkennen; bestätigen Sie bei Bedarf die Spezifität durch Peptidkonkurrenz oder Knockdown-/Knockout-Modelle.

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