Anti-iNOS Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P35228

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: iNOS-Funktion und -Lokalisierung

• Stickstoffmonoxid-Synthase, induzierbar (iNOS), auch bekannt als NOS2A, HEP-NOS oder NOS Typ II, ist ein kalzium/calmodulin-abhängiges Enzym, das die Produktion von Stickstoffmonoxid (NO) aus L-Arginin katalysiert, mit vielfältigen Signalfunktionen. Verwandte Referenzen: PMID:7504305, PMID:7531687, PMID:7544004
• In Makrophagen vermittelt das von iNOS stammende NO tumorzide und bakterizide Wirkungen, und das Enzym zeigt auch Nitrosylase-Aktivität, indem es die Cystein-S-Nitrosylierung von zytoplasmatischen Zielen wie PTGS2/COX2 katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:25417112
• Als Teil des iNOS-S100A8/9-Transnitrosylase-Komplexes erleichtert iNOS die reizabhängige S-Nitrosylierung von GAPDH an „Cys-247“, was die Aktivität des GAIT-Komplexes beeinflusst und Ziele wie ANXA5, EZR, MSN und VIM moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:25417112
• iNOS ist an Entzündungen beteiligt und verstärkt die Synthese proinflammatorischer Mediatoren wie IL6 und IL8. Verwandte Referenzen: PMID:19688109
• Subzellulär lokalisiert sich iNOS im Zytoplasma und Zytosol, was seiner enzymatischen Funktion entspricht.
• Die Gewebeexpression wird in der Leber, der Netzhaut, den Knochenzellen, den Atemwegsepithelzellen der Lunge und den Chondrozyten berichtet; sie wird nicht in Blutplättchen exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:7504305
• iNOS gehört zur NOS-Familie und enthält mehrere Cofaktor-bindende Domänen, einschließlich FAD, FMN, Häm und NADP, sowie regulatorische Kalzium/Calmodulin-bindende und Phosphorylierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 974–1143 von humanem iNOS (NP_000616.3), einer C-terminalen Region; dieser polyklonale Antikörper kann sowohl die Volllängenform als auch trunkierte Formen erkennen, aber eine Validierung im Zielsamplesystem wird empfohlen.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 131 kDa erwartet; positive Kontrollen können Lysate aus IFN-γ/LPS-stimulierten RAW 264.7 (Maus) oder THP-1 (Mensch) Makrophagenzellen umfassen.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem iNOS wird berichtet; für andere Spezies sollte vor dem routinemäßigen Gebrauch in geeigneten Modellen getestet werden.
• Im ELISA kann der Antikörper für die Detektion oder das Capture verwendet werden; eine Optimierung der Beschichtungskonzentration und der Blockierungsbedingungen wird für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis empfohlen.

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