Anti-iNOS monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P35228

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von iNOS

• Kodiert durch das NOS2-Gen (auch bekannt als iNOS, NOS2A, HEP-NOS) ist diese induzierbare Stickstoffmonoxid-Synthase ein Schlüsselenzym der NOS-Familie, exprimiert in zahlreichen Geweben wie Leber, Netzhaut, Knochen und Atemwegsepithel.
• Produziert Stickstoffmonoxid (NO), ein vielseitiges Botenmolekül mit Funktionen von der Vasodilatation bis zur Immunabwehr (PubMed:7504305, PubMed:7531687, PubMed:7544004). Verwandte Referenzen: PMID:7504305 PMID:7531687 PMID:7544004
• In Makrophagen vermittelt NO tumortödtende und bakterizide Wirkungen und trägt so zur angeborenen Immunität bei.
• Wirkt als Peptidyl-Cystein-S-Nitrosylase und vermittelt die S-Nitrosylierung von zytoplasmatischen Zielen wie PTGS2/COX2 (durch Ähnlichkeit) und GAPDH (PubMed:25417112). Als Teil des iNOS-S100A8/9-Transnitrosylase-Komplexes S-nitrosyliert es GAPDH selektiv an Cys-247 und moduliert so die Aktivität des GAIT-Komplexes und Entzündungsreaktionen. Verwandte Referenzen: PMID:25417112
• Verbessert die Synthese der proentzündlichen Mediatoren IL6 und IL8 und verstärkt so Entzündungskaskaden weiter (PubMed:19688109). Verwandte Referenzen: PMID:19688109
• Lokalisiert überwiegend im Zytoplasma/Zytosol, wo es für seine enzymatische Aktivität mit Calmodulin und anderen Kofaktoren interagiert.
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung und benötigt mehrere Kofaktoren wie Häm, FAD, FMN, NADP und Zink für seine katalytische Funktion.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das vorausgesagte Molekulargewicht beträgt 131 kDa; bei einem Western Blot ist eine Bande in der Nähe dieser Größe zu erwarten. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen und validieren Sie mit einem relevanten Positivkontrolle (z. B. mit LPS/IFN-γ stimulierte RAW264.7-Maus-Makrophagen).
• Für die Immunfluoreszenz fixieren Sie die Zellen schonend und erwägen Sie eine Co-Färbung mit einem zytoplasmatischen Marker. Überprüfen Sie die Expression in Ihrem System, da iNOS induzierbar ist.
• Bei ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass das Capture/Detection-Antikörperpaar kompatibel ist; die monoklonale Natur dieses Antikörpers kann eine konsistente Spezifität gewährleisten.

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