Anti-IL33 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - O95760

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Interleukin-33

• Interleukin-33 (IL-33), auch bekannt als IL-1F11 und NF-HEV, ist ein Protein mit Doppelfunktion, das vom IL33-Gen (C9orf26, IL1F11, NFHEV) kodiert wird. Es existiert sowohl als sezerniertes Zytokin als auch als nuklearer Faktor, wobei alternatives Spleißen mehrere Isoformen erzeugt.
• Als Zytokin bindet IL-33 an den IL1RL1/ST2-Rezeptor und aktiviert die NF-kappa-B- und MAPK-Signalwege. Es fördert die Reifung von Th2-Zellen und die Sekretion von Typ-2-Zytokinen und aktiviert Mastzellen, Basophile, Eosinophile und natürliche Killerzellen. Verwandte Referenzen: PMID:16286016 PMID:19841166 PMID:17853410 PMID:18836528
• IL-33 verstärkt die alternative Makrophagenpolarisation und wirkt als Chemotaxis-Faktor für Th2-Zellen. Es fungiert als „Alarmin“, das bei Gewebeverletzungen freigesetzt wird, um Immunantworten zu verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:19841166 PMID:17853410 PMID:18836528
• Die ungespaltene nukleäre Form von IL-33 ist hochexprimiert in ruhenden Endothelzellen, wo sie als chromatin-assoziierter transkriptioneller Repressor wirkt, indem sie NF-kappaB/RELA sequestriert und die Expression pro-inflammatorischer Gene reduziert. Diese Form geht bei angiogener oder pro-inflammatorischer Aktivierung schnell verloren. Verwandte Referenzen: PMID:21734074 PMID:18787100
• IL-33 induziert eine schnelle UCP2-abhängige mitochondriale Umprogrammierung in Makrophagen, dämpft reaktive Sauerstoffspezies und erhält die Integrität des Krebs-Zyklus für eine anhaltende Itaconat-Produktion, was die Differenzierung von entzündungslösenden, alternativ aktivierten Makrophagen unterstützt (nach Homologie).
• Die subzelluläre Lokalisierung variiert zwischen der nukleären Form (Kern, Chromosom) und der sezernierten Form (Zytoplasma, zytoplasmatische Vesikel, Sekretion), was die Doppelfunktionalität widerspiegelt.
• Gewebsspezifität: Hochexprimiert in hohen endothelialen Venulen (High Endothelial Venules) der Mandeln, Peyer-Plaques und mesenterialen Lymphknoten; fast nicht nachweisbar in der Plazenta.
• Schlüsselwörter: 3D-Struktur, alternatives Spleißen, Chromosom, Zytokin, Zytoplasma, zytoplasmatisches Vesikel, direkte Proteinsequenzierung, Kern, Proteomics-Identifizierung, Referenzproteom, sezerniert, Transkription.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 109-270 von humanem IL33 (NP_001300974.1), was die reife Zytokindomäne abdeckt. Für WB sollten Sie positive Kontrollen wie stimulierte Endothelzellen oder rekombinantes IL-33 in Betracht ziehen und beachten, dass sowohl die Volllängenform als auch die gespaltene Form bei Massen um 31 kDa oder darunter nachgewiesen werden können.
• Für IF/ICC und IHC-P validieren Sie die nukleären und zytoplasmatischen Färbemuster in relevanten Gewebsschnitten oder Zelllinien, die IL-33 exprimieren; führen Sie geeignete Kontrollen durch, um die Spezifität zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung dieses Antikörpers als Capture- oder Detektionsreagenz entwickelt werden; titrieren Sie sowohl Antikörper als auch Antigen, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Angesichts der dualen nukleären und sezernierten Funktionen wählen Sie Probenvorbereitungsprotokolle, die beide Kompartimente erhalten, wenn Sie die Gesamt-IL-33-Expression untersuchen.

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