Anti-IL1β Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P10749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL1β-Funktion und Lokalisierung

• IL1β, auch bekannt als Interleukin-1 beta, ist ein potentes pro-inflammatorisches Zytokin aus der IL-1-Familie. Es wird zunächst als inaktives Prä-Protein produziert, das einen proteolytischen Spaltungsprozess zur Aktivierung benötigt.
• Das reife IL1β wird über Gasdermin-D (GSDMD)-Poren in die extrazelluläre Umgebung freigesetzt, ein Prozess, der mit pyroptotischem Zelltod verbunden ist und so die Entzündung nach Inflammasom-Aktivierung vermittelt.
• IL1β hat breite immunmodulatorische Funktionen, einschließlich der Induktion von Fieber (endogenes Pyrogen), der Förderung der T-Zell-Aktivierung, der Th17-Differenzierung und der B-Zell-Antikörperproduktion.
• Es wirkt synergistisch mit anderen Zytokinen wie IL12, um die Interferon-gamma (IFNG)-Produktion aus Th1-Zellen zu stimulieren, und mit TNF und IL6, um über VEGF-Induktion Angiogenese zu fördern.
• Subzellulär ist IL1β in seiner inaktiven Form im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert, während das reife Zytokin sezerniert wird und auch in Lysosomen und extrazellulären Exosomen vorkommen kann.
• Die Gewebeexpression erfolgt überwiegend in aktivierten Immunzellen wie Makrophagen, was mit seiner Rolle in angeborenen und adaptiven Immunantworten übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen monoklonalen Antikörper ist ein rekombinantes Fusionsprotein entsprechend den Aminosäuren 100–269 von Maus-IL1β. Diese Region kann lineare Epitope enthalten, was sie für Anwendungen wie Western Blotting (WB) unter denaturierenden Bedingungen geeignet macht.
• Für WB sollten Sie die Verwendung von Gesamtzelllysaten aus aktivierten Maus-Makrophagen oder anderen IL1β-exprimierenden Zellen in Betracht ziehen. Der Nachweis der 31 kDa reifen Form kann eine geeignete Stimulation erfordern, um die Prozessierung und Sekretion zu induzieren.
• In ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz getestet werden. Validieren Sie seine Leistung mit rekombinantem Maus-IL1β-Protein und in biologischen Proben wie Zellkulturüberständen oder Serum, wobei eine geeignete Verdünnungsoptimierung und Kontrollen für Matrixeffekte sicherzustellen sind.
• Beachten Sie, dass Kreuzreaktivität für Maus-IL1β angegeben ist; überprüfen Sie die Reaktivität im beabsichtigten Probentyp und berücksichtigen Sie mögliche speziesspezifische Unterschiede, wenn es in Modellen außerhalb der Maus verwendet wird.

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