Anti-IL-31 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q6EBC2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL-31-Funktion und Lokalisation

• Interleukin-31 (IL-31) ist ein sekretiertes Zytokin, das über einen heterodimeren Rezeptorkomplex aus Oncostatin-M-Rezeptor (OSMR) und IL-31-Rezeptor A (IL31RA) signalisiert (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Verwandte Referenzen: PMID:15184896 PMID:15627637
• Nach Ligandenbindung heterodimerisiert IL31RA mit OSMR, was zur Aktivierung der Janus-Kinasen JAK1 und JAK2 führt, die Tyrosinreste an den Rezeptoruntereinheiten phosphorylieren und so Andockstellen für die Transkriptionsfaktoren STAT1, STAT3 und STAT5B schaffen (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Verwandte Referenzen: PMID:15184896 PMID:15627637
• Die IL-31-Signalgebung aktiviert auch den MAPK-Weg (ERK1/2) durch Rekrutierung des Adapterproteins SHC1 (PubMed:15627637). Verwandte Referenzen: PMID:15627637
• Spielt eine kritische Rolle in der Hautimmunität mit Bedeutung für entzündliche Hauterkrankungen (PubMed:15184896). Verwandte Referenzen: PMID:15184896
• Verbessert das Überleben myeloider Vorläuferzellen in vitro und induziert die Expression von Resistin-like alpha (RETNLA) und Serum-Amyloid-A-Protein in Makrophagen (By similarity).
• Die subzelluläre Lokalisation ist primär sekretorisch, was mit seiner Zytokinfunktion übereinstimmt.
• In geringen Mengen in mehreren Geweben nachgewiesen, darunter Hoden, Knochenmark, Skelettmuskel, Niere, Dickdarm, Thymus, Dünndarm und Luftröhre.
• Enthält ein Signalpeptid und ist N-glykosyliert; das vorhergesagte reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 18,2 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 24-164 von humanem IL-31, entsprechend dem reifen sekretierten Protein. Dieses rekombinante Protein wurde als Immunogen verwendet, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die native verarbeitete Form erkennt; erwägen Sie denaturierende Bedingungen für Western Blot, um eine vollständige Entfaltung sicherzustellen, überprüfen Sie jedoch die Leistung unter nativen Bedingungen für IF/ICC.
• Für Western Blot ist ein Protein von etwa 18 kDa zu erwarten. Verwenden Sie ein 12-15% SDS-PAGE-Gel für eine optimale Auflösung niedermolekularer Proteine und transferieren Sie auf eine PVDF- oder Nitrozellulosemembran mit 0,2 µm Porengröße.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie, da IL-31 sekretiert wird, fügen Sie dem Kulturmedium vor der Fixierung einen Proteintransportinhibitor (z.B. Brefeldin A) hinzu, um intrazelluläres Protein einzufangen. Validieren Sie das Färbemuster mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Für ELISA kann der monoklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in einem Sandwich-Format bewertet werden, gepaart mit einem anderen Klon oder einem polyklonalen Antikörper. Testen Sie optimale Beschichtungskonzentrationen und Pufferbedingungen empirisch.
• Obwohl für human validiert, wurde Kreuzreaktivität mit anderen Spezies nicht berichtet; testen Sie die Reaktivität in Ihrem Modellsystem, wenn Sie nicht-menschliche Proben verwenden.

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