Anti-IKKβ-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14920

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IKKβ

• IKKβ, auch als IKK2 oder IKBKB bezeichnet, ist eine Serin/Threonin-Kinase und die katalytische Untereinheit des IκB-Kinase-(IKK-)Komplexes, die für die kanonische NF-kappa-B-Signalübertragung entscheidend ist. Zugehörige Referenzen: PMID:9346484
• Es phosphoryliert Inhibitoren von NF-kappa-B (IκBs) an kritischen Serinresten und löst dadurch deren Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau aus. Dadurch wird NF-kappa-B freigesetzt, kann in den Zellkern translozieren und die Transkription von Genen aktivieren, die an Immunreaktionen, Zellproliferation und Apoptosehemmung beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Neben IκBs phosphoryliert IKKβ mehrere Signalkomponenten, darunter NEMO, RELA, NFKB1, TBK1 und IKBKE, sowie Substrate wie FOXO3, NAA10, NCOA3, BCL10, IRS1, RIPK1 und IRF5, wodurch Immunreaktionen und Signalwege des Zelltods feinreguliert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276, PMID:15084260, PMID:17213322, PMID:19716809, PMID:25326418
• Nach der durch LPS induzierten Endozytose von TLR4 phosphoryliert IKKβ STAT1 an Thr-749, wodurch die ARID5A-Expression und die Stabilisierung von IL-6 sowie die Transkription von IL-12B gefördert werden. Dies stellt eine Verbindung zwischen angeborener Entzündung und adaptiver Immunität her. Zugehörige Referenzen: PMID:38621137, PMID:32209697
• IKKβ befindet sich im Zytoplasma, im Zellkern und in Membran-Rafts, was mit seinen dynamischen Funktionen bei der Signalübertragung übereinstimmt.
• Es wird stark im Herzen, in der Plazenta, der Skelettmuskulatur, den Nieren, der Bauchspeicheldrüse, der Milz, dem Thymus, der Prostata, den Hoden und im peripheren Blut exprimiert, was seine vielfältigen regulatorischen Funktionen widerspiegelt.
• Schlüsselwörter weisen auf seine Beteiligung an Phosphorylierung, Acetylierung, Ubiquitinierung, Wirt-Virus-Interaktionen und krankheitsassoziierten Varianten hin. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 87 kDa, wobei die experimentelle Detektion aufgrund von Isoformen und Spaltung im Bereich von 29–87 kDa liegen kann.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Beim Western-Blot wird eine Bande entsprechend dem vollständigen IKKβ nahe 87 kDa erwartet. Aufgrund von alternativem Spleißen, Abbau oder posttranslationalen Modifikationen können jedoch mehrere Banden zwischen 29–87 kDa beobachtet werden. Zur Bestätigung der Spezifität sollten Positivkontrollen verwendet werden, beispielsweise TNFα-stimulierte HeLa- oder Jurkat-Zellen.
• Im ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden. Für die Entwicklung eines Sandwich-ELISAs sollte eine Kombination mit einem validierten monoklonalen Antikörper gegen IKKβ in Betracht gezogen werden. Zur Bestimmung der optimalen Arbeitskonzentrationen werden Titrationsexperimente empfohlen.
• Da sich der Immunogenbereich über die Aminosäuren 400–669 erstreckt, richtet sich der Antikörper gegen die C-terminale Hälfte des Proteins. Daher erkennt er möglicherweise keine N-terminalen Verkürzungen oder bestimmte krankheitsassoziierte Mutanten. Eine Kreuzreaktivität mit eng verwandten Familienmitgliedern wie IKKα sollte experimentell anhand rekombinanter Proteine oder Knockout-Lysaten untersucht werden.

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