Anti-IKKγ-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, IP, ELISA - Q9Y6K9

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von IKKγ

• IKKγ, auch als NEMO oder IKBKG bezeichnet, ist die regulatorische Untereinheit des kanonischen IκB-Kinase-(IKK-)Komplexes und für die NF-κB-Signalübertragung essenziell. Es fungiert als Gerüst und koordiniert die Kinaseuntereinheiten IKKα und IKKβ.
• Die Kernfunktion von IKKγ besteht darin, die Phosphorylierung und den anschließenden ubiquitinabhängigen Abbau von NF-κB-Inhibitoren (IκBs) zu erleichtern, wodurch NF-κB für die Translokation in den Zellkern und die Aktivierung von Zielgenen freigesetzt wird (PubMed:14695475, PubMed:20724660, PubMed:21518757). Zugehörige Referenzen: PMID:14695475 PMID:20724660 PMID:21518757
• Es erkennt und bindet spezifisch Polyubiquitinketten und weist eine hohe Affinität für lineares (M1-verknüpftes) und Lys-63-verknüpftes Ubiquitin auf. Diese Ubiquitin-Erkennungsfähigkeit ist für die IKK-Aktivierung nachgeschaltet von TNF, IL-1 und Toll-like-Rezeptoren entscheidend (PubMed:16547522, PubMed:18287044, PubMed:19033441). Zugehörige Referenzen: PMID:16547522 PMID:18287044 PMID:19033441
• IKKγ pendelt zwischen dem Zytoplasma und dem Zellkern und trägt zu DNA-Schadensreaktionen sowie zur Transkriptionsregulation bei.
• Das Protein ist an der antiviralen angeborenen Immunität beteiligt: Es ist nach einer Virusinfektion für die Aktivierung von IRF3 essenziell (PubMed:19854139) und vermittelt TLR3/IFIH1-Signalwege durch Lys-27-verknüpfte Polyubiquitinierung (PubMed:20724660). Zugehörige Referenzen: PMID:19854139 PMID:20724660
• IKKγ wird in menschlichen Geweben, einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse, breit exprimiert.
• Mutationen im IKBKG-Gen stehen mit mehreren genetischen Erkrankungen in Verbindung, darunter Incontinentia pigmenti, anhidrotische ektodermale Dysplasie mit Immundefizienz und Osteopetrose.
• Das Protein enthält eine Coiled-Coil-Domäne und einen C-terminalen Zinkfinger, der Protein-Protein-Interaktionen und die Ubiquitinbindung vermittelt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das nahezu die vollständige Länge des menschlichen IKKγ abdeckt (AS 1-419). Als polyklonaler Kaninchen-Antikörper kann es mehrere Epitope erkennen und verschiedene Isoformen oder posttranslational modifizierte Formen des Zielproteins nachweisen.
• Beim Western Blot können mehrere Banden beobachtet werden (vorhergesagte Molekulargewichte von 37, 48 und 56 kDa), die möglicherweise Spleißvarianten oder modifizierte Proteinformen darstellen. Validieren Sie den Nachweis und die relative Bandenintensität mithilfe geeigneter positiver und negativer Kontrolllysate aus menschlichen oder murinen Zelllinien.
• Bei der Immunpräzipitation sollten Vorreinigungsschritte und geeignete Bedingungen für den Lysepuffer optimiert werden, da IKKγ in einem großen Multiproteinkomplex vorliegt.
• Für ELISA-Anwendungen sollte die Verwendung eines passenden Antikörperpaars für den Fang und den Nachweis in Betracht gezogen und die Sensitivität mit rekombinantem IKKγ oder bekannten Positivproben überprüft werden.
• Aufgrund der hohen Kreuzreaktivität mit Maus eignet sich dieser Antikörper für Studien an Mausmodellen. Er sollte jedoch im jeweils interessierenden Gewebe oder Zelltyp validiert werden.

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