Anti-IKKε (IKBKE) Kaninchen polyklonale Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14164

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IKKε (IKBKE)

• IKKε (IKBKE) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die inflammatorische und antivirale Antworten durch Aktivierung von Typ-I-Interferon-, NF-κB- und STAT-Signalwegen vermittelt.
• Bei einer viralen Infektion interagiert IKKε mit RNASensoren (z. B. RIG-I) und Adaptoren (z. B. MAVS, TANK), um IRF3 und IRF7 zu phosphorylieren, was ihre Dimerisierung und nukleäre Translokation induziert, um die antivirale Genexpression anzutreiben.
• IKKε phosphoryliert zudem STAT1 an Ser-708, was die Bildung von ISGF3-Komplexen (STAT1-STAT2-IRF9) und die Induktion von interferonstimulierten Genen (ISGs) mit direkter antiviraler Aktivität fördert.
• Über die Immunität hinaus trägt IKKε zur Energiehomöostase bei, indem es durch Fettleibigkeit bedingte chronische Entzündungen aufrechterhält, die die Insulinsensitivität negativ beeinflussen, und phosphoryliert AKT1.
• Subzellulär lokalisiert sich IKKε im Zytoplasma, Zellkern und in PML-Kernkörpern, was seine dynamische Rolle bei der Signaltransduktion widerspiegelt.
• Das Protein wird stark in lymphoiden Geweben (Milz, Thymus, periphere Blutleukozyten) und der Bauchspeicheldrüse/Plazenta exprimiert, mit geringeren Gehalten in Lunge, Niere, Prostata, Ovar und Kolon.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Polyubiquitinierung, die für seine Aktivierung als Reaktion auf TNFα und IL-1 kritisch sind.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, was zur funktionellen Diversität von IKKε beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper sollte eine Bande bei ~80 kDa im Western Blot nachweisen; überprüfen Sie die Bandengröße mit Positivkontrolllysaten (z. B. Jurkat, THP-1 oder Milzgewebe).
• Für IHC-P und IF/ICC optimieren Sie Fixierungs- und Antigenrückgewinnungsbedingungen; Citratpuffer (pH 6,0) mit hitzeinduzierter Epitoprückgewinnung ist üblicherweise wirksam.
• Bei der Untersuchung der IKKε-Aktivierung kombinieren Sie diesen Antikörper nach Möglichkeit mit phosphospezifischen oder aktivierungsabhängigen Sonden, um den Phosphorylierungsstatus zu bestimmen.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in Maus- und Rattengeweben mit geeigneten artspezifischen Kontrollen und beachten Sie potenzielle artabhängige Hintergrundsignale.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz verwendet werden; titrieren Sie ihn, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.

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