Kaninchen-monoklonaler Anti-IKKα-Antikörper für WB, ELISA – O15111

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IKKα

• Der Inhibitor der Kinase der Kernfaktor-kappa-B-Untereinheit alpha (IKKα), auch bekannt als CHUK, IKK1, IKKA oder TCF-16, ist eine Serin/Threonin-Kinase, die für die NF-kappa-B-Signalübertragung essenziell ist und durch entzündliche Zytokine, bakterielle/virale Produkte oder zellulären Stress aktiviert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:18626576 PMID:9244310 PMID:9252186

• Im kanonischen NF-κB-Signalweg phosphoryliert IKKα Inhibitoren von NF-κB (IκBs) an Serinresten, wodurch deren ubiquitinabhängiger Abbau ausgelöst wird und NF-κB zur Translokation in den Zellkern sowie zur Aktivierung der Transkription von Immun- und Überlebensgenen freigesetzt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:18626576 PMID:9244310 PMID:9252186

• Als Bestandteil des nicht-kanonischen NF-κB-Signalwegs phosphoryliert das CHUK/IKKα-Homodimer NFKB2/p100, um dessen Prozessierung zu p52 und die Bildung transkriptionell aktiver RelB-p52-Komplexe zu fördern, die das Überleben von B-Zellen und die Lymphoidentwicklung regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:20501937

• IKKα reguliert die NF-κB-Signalübertragung negativ, indem es TAXBP1 phosphoryliert, um den A20-Ubiquitin-Editierungskomplex zusammenzusetzen, und MAP3K14/NIK im nicht-kanonischen Signalweg destabilisiert, wodurch eine wichtige Rückkopplungskontrolle gewährleistet wird. Zugehörige Referenzen: PMID:21765415

• Im Zellkern phosphoryliert IKKα direkt Histon H3 an Ser-10 sowie die Acetyltransferase CREBBP und erhöht dadurch die Zugänglichkeit des Chromatins und die transkriptionelle Aktivität an NF-κB-responsiven Promotoren. Zugehörige Referenzen: PMID:12789342 PMID:17434128

• Zu den weiteren Substraten gehören FOXO3 (proapoptotischer Transkriptionsfaktor), RIPK1 (Regulation der Nekroptose) und AMBRA1 (Mitophagie), was die vielfältigen zellulären Funktionen hervorhebt. Zugehörige Referenzen: PMID:15084260 PMID:30217973

• IKKα wird weitgehend exprimiert und ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, wo es regulatorischer Acetylierung und Phosphorylierung unterliegt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein von CHUK abgeleitetes synthetisches Peptid; daher kann dieser monoklonale Antikörper endogenes IKKα in Proben von Mensch, Maus und Ratte erkennen. Es wird empfohlen, die Reaktivität in den jeweils verwendeten Zelllinien und Geweben zu validieren.
• Beim Western Blot wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 85 kDa erwartet. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und die Probenbeladung entsprechend den IKKα-Expressionsniveaus in Ihrem System.
• Für ELISA sollte nach Bestimmung der optimalen Beschichtungskonzentration und Inkubationsbedingungen ein geeignetes Fang-/Detektionssystem verwendet werden.
• Da IKKα an verschiedenen Signalkomplexen beteiligt ist, sollten Co-Immunpräzipitations- oder Pull-down-Assays sorgfältig durchgeführt werden, da die Zugänglichkeit des Epitops variieren kann.

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