Anti-Ikaros Kaninchen-Polyclonales Antikörper für WB - Q13422

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Ikaros

• DNA-bindendes Protein Ikaros (IKZF1) ist ein Zinkfinger-Transkriptionsfaktor der Ikaros-Familie, kodiert vom IKZF1-Gen (auch bekannt als LYF1, ZNFN1A1). Es ist ein Schlüsselregulator der hämatopoetischen Zelldifferenzierung (PubMed:17934067). Verwandte Referenzen: PMID:17934067
• Ikaros bindet an Gamma-Satelliten-DNA und trägt zur Regulation der Chromatinstruktur und Genexpression bei (PubMed:17135265, PubMed:19141594). Verwandte Referenzen: PMID:17135265 | PMID:19141594
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung von Lymphozyten, sowohl B- als auch T-Zellen, indem es während der Thymozytendifferenzierung an den Enhancer des CD3-Delta-Gens bindet und diesen aktiviert sowie das TdT-Gen repriminiert.
• Durch Assoziation mit HDAC-abhängigen und HDAC-unabhängigen Komplexen reguliert Ikaros die Transkription und zielgerichtet die Chromatin-Remodellierungskomplexe NuRD und BAF (SWI/SNF) über den PYR-Komplex an den Beta-Globin-Lokus in adulten Erythrozyten.
• Ikaros erhöht die normale Apoptose in adulten erythroiden Zellen und verleiht retinalen Vorläuferzellen (RPCs) frühe temporäre Kompetenz (Nach Ähnlichkeit).
• Die Funktion von Ikaros ist isoformspezifisch und wird durch dominant-negative inaktive Isoformen moduliert (PubMed:17135265, PubMed:17934067). Verwandte Referenzen: PMID:17135265 | PMID:17934067
• Die subzelluläre Lokalisation ist primär nukleär, es kann aber auch im Zytoplasma gefunden werden. Die Gewebeexpression ist reichlich in Thymus, Milz, peripheren Blutleukozyten und Lymphknoten, mit geringeren Spiegeln in Knochenmark und Dünndarm.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Isopeptidbindung; das Protein enthält mehrere Zinkfinger vom Typ C2H2, die für die DNA-Bindung essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aa 1-270) von menschlichem Ikaros und umfasst wichtige Funktionsdomänen; dieses Design ermöglicht möglicherweise die Erkennung mehrerer Isoformen, die diese Sequenz teilen. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem experimentellen System mit geeigneten Kontrollen, wie zum Beispiel Ikaros-Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Für Western Blot (WB) erwägen Sie die Verwendung von Kernextrakten aus lymphoiden Geweben oder Zelllinien (z. B. Thymus, Milz, Jurkat), da Ikaros in diesen Proben reichlich exprimiert ist. Für das Volllängenprotein ist eine Bande um 58 kDa zu erwarten.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) zeigt Ikaros überwiegend nukleäre Färbung; sorgen Sie für ausreichende Permeabilisierung und erwägen Sie eine Co-Färbung mit einem Nukleärmarker.
• Bei der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) überprüfen Sie, ob der Antikörper Ikaros-gebundene genomische Loci effizient immunpräzipitieren kann. Optimieren Sie die Quervernetzungs- und Sonikationsbedingungen für Ihren Zelltyp.
• Dieser Antikörper weist nachweislich Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Ikaros auf; dennoch wird eine Sequenzabgleichung des Immunogenpeptids über Spezies hinweg empfohlen, um die Eignung für diese Modelle zu bestätigen.

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