Anti-Ikaros Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13422

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Ikaros Funktion und Lokalisation

• DNA-bindendes Protein Ikaros (IKZF1) wirkt als Transkriptionsregulator, der für die Differenzierung hämatopoetischer Zellen essenziell ist, vor allem während der Lymphozytenentwicklung und Erythrozytenreifung.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:17934067
• Bindet Gamma-Satelliten-DNA und trägt so zur Chromatinorganisation und Genstilllegung bei.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:17135265 PMID:19141594
• Die Funktionen sind isoformspezifisch, wobei dominant-negative Isoformen die transkriptionelle Aktivität modulieren; alternatives Spleißen erzeugt Varianten mit unterschiedlichen DNA-bindenden und regulatorischen Eigenschaften.
• Lokalisiert überwiegend im Zellkern, kann aber auch im Zytoplasma nachgewiesen werden – was mit seinen Rollen bei der Transkription und Chromatinumformung übereinstimmt.
• Rekrutiert Chromatin-Umformungskomplexe (NuRD und BAF) an Zielorte, wie das Beta-Globin-Gen, und verbindet so epigenetische Regulation mit linienspezifischer Genexpression.
• Wird stark in lymphoiden Geweben (Thymus, Milz, periphere Blutleukozyten, Lymphknoten) exprimiert, in geringerem Maße in Knochenmark und Dünndarm – was seine hämatopoese-spezifischen Funktionen widerspiegelt.
• Wird posttranslational durch Phosphorylierung und ubiquitin-ähnliche Konjugation (Isopeptidbindungen) modifiziert, was die Protein Stabilität und transkriptionelle Aktivität beeinflussen kann.
• Schlüsselwörter aus UniProt unterstreichen die Beteiligung an Zellzyklus, Chromatinregulation und Entwicklungsprozessen, mit dokumentierten Krankheitsassozionationen und Chromosomenumlagerungen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 296–457 des menschlichen Ikaros (NP_006051.1) und deckt die C-terminale Region ab, die über mehrere Isoformen hinweg konserviert ist; verwenden Sie in Ihren Assays isoformspezifische Kontrollen.
• Für das Western Blotting (WB) validieren Sie die Antikörperspezifität in menschlichen Lymphozyten- oder Erythrozytenzelllinien (z. B. Jurkat, K562) und verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen.
• Bei der ELISA titrieren Sie den Antikörper sorgfältig und fügen Sie Negativkontrollen (z. B. Ikaros-Knockout-Lysate) hinzu, um die Signalspezifität zu bestätigen.
• Da Ikaros alternatives Spleißen und posttranslationale Modifikationen unterliegt, kann die beobachtete Bandengröße von dem theoretischen Wert von 58 kDa abweichen; führen Sie reduzierende und nicht-reduzierende Gelelektrophorese durch, um monomere und modifizierte Formen zu unterscheiden.
• Kreuzreaktivität ist nur für menschliches Ikaros dokumentiert; führen Sie eine Sequenzalignment durch, bevor Sie Tests an anderen Spezies durchführen.

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