Anti-Ikaros monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA, ChIP, CUT&Tag - Q13422

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Ikaros-Funktion und -Lokalisierung

• Ikaros (IKZF1) ist ein DNA-bindender Zinkfinger-Transkriptionsfaktor, der zur Ikaros-Familie gehört, auch bekannt als lymphoider Transkriptionsfaktor LyF-1. Durch alternatives Spleißen werden mehrere Isoformen produziert, von denen einige als dominant-negative Regulatoren fungieren (PubMed:17135265, PubMed:17934067). Verwandte Referenzen: PMID:17135265 PMID:17934067
• Es fungiert als Schlüsselregulator der Differenzierung hämatopoetischer Zellen und spielt eine kritische Rolle bei der Entwicklung von Lymphozyten, insbesondere B- und T-Zellen. Es bindet und aktiviert den Enhancer des CD3-delta-Gens und reprimiert das TDT-Gen während der Thymozytendifferenzierung (PubMed:17934067). Verwandte Referenzen: PMID:17934067
• Ikaros moduliert die Chromatinstruktur, indem er Chromatin-Remodeling-Komplexe wie NuRD und BAF (SWI/SNF) an Zielloci rekrutiert, einschließlich des Beta-Globin-Locus in adulten Erythrozyten, wodurch der PYR-Komplex gebildet wird.
• Es bindet an Gamma-Satelliten-DNA und trägt zur Organisation der perizentromerischen Heterochromatin bei (PubMed:17135265, PubMed:19141594). Verwandte Referenzen: PMID:17135265 PMID:19141594
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär nukleär, was mit ihrer Rolle bei der Transkriptionsregulation übereinstimmt, aber auch eine zytoplasmatische Detektion wurde berichtet.
• Reichlich exprimiert in lymphoiden Geweben wie Thymus, Milz, peripheren Blutzellen und Lymphknoten, mit niedrigeren Spiegeln im Knochenmark und im Dünndarm.
• Das Protein unterliegt posttranslationaler Phosphorylierung und ubiquitinähnlicher Konjugation, was seine Aktivität und Stabilität regulieren kann. Es enthält mehrere C2H2-Typ-Zinkfinger für die DNA-Bindung und Protein-Protein-Interaktionen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 250-350 von humanem Ikaros entspricht, einem Bereich außerhalb der Zinkfingerdomänen. Dies kann die Detektion mehrerer Isoformen ermöglichen.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 58 kDa, aber isoformspezifische Bänder können in unterschiedlichen Größen erscheinen. Validieren Sie die Bandmuster in relevanten Zelllysaten (z. B. Jurkat, Thymus).
• Für Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) und CUT&Tag-Assays ist es aufgrund der Assoziation von Ikaros mit Chromatin ratsam, die Fixierungsbedingungen zu optimieren und die Anreicherung an bekannten Zielgenen (z. B. CD3-delta, Gamma-Satellit) in hämatopoetischen Zellen zu validieren.
• Bei Immunfluoreszenz (IF) und Immunzytochemie (ICC) ist vorwiegend eine Kernfärbung zu erwarten. Eine Co-Färbung mit einem Kernmarker wird empfohlen.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Mausproben, was für translationsrelevante Studien von Vorteil sein kann; es wird jedoch eine Sequenzausrichtung des Immunogenbereichs vor der Verwendung in Mausmodellen empfohlen.

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