Anti-IGF2BP3-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00425

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: IGF2BP3-Funktion und -Lokalisierung

• Das insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3 (IGF2BP3), auch bekannt als IMP3 oder KOC, ist ein Mitglied der VICKZ-Familie von RNA-bindenden Proteinen und wird beim Menschen durch das IGF2BP3-Gen (GenID: 10643) kodiert.
• IGF2BP3 wirkt als RNA-bindender Faktor, der Zieltranskripte in zytoplasmische messenger ribonucleoprotein (mRNP)-Komplexe rekrutiert, was den mRNA-Transport, die vorübergehende Speicherung und den Schutz vor Endonukleaseangriffen oder microRNA-vermittelter Abbau ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:29476152
• Es bindet bevorzugt an N6-methyladenosin (m6A)-modifizierte mRNAs und verbessert deren Stabilität; beispielsweise stabilisiert es CD44-mRNA durch Bindung an deren 3'-UTR (Förderung der Zelladhäsion und Invadopodien bei Krebs) und MYC-mRNA durch Bindung an den Kodierungsregion-Instabilitätsdeterminanten (CRD) auf m6A-abhängige Weise. Verwandte Referenzen: PMID:29476152
• IGF2BP3 bindet auch an die 5'-UTR von insulin-like growth factor 2 (IGF2) mRNAs, was es an der Regulation von Wachstumsfaktoren beteiligt.
• Das Protein lokalisiert sich im Zellkern, Zytoplasma, P-Bodies und Stress-Granula, was seine dynamischen Rollen bei mRNA-Schicksalsentscheidungen widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression ist prominent in fötaler Leber, Lunge, Niere, Thymus, Plazenta und verschiedenen Krebsarten (z. B. Zervixadenokarzinom, Hoden-, Pankreas- und Nierenzellkarzinome), und es wird während der fötalen Entwicklung weitgehend exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation (Isopeptidbindung), die seine Aktivität oder Stabilität regulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht einem Bereich (Aminosäuren 300–579), der distal zu den kanonischen RNA-Bindedomänen liegt, was potenziell Interferenzen mit der Zielbindung in IP- oder IF-Anwendungen minimiert.
• Für Western Blot (WB) beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 64 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines reduzierenden Gels und geeigneter Molekulargewichtsmarker.
• Bei IHC-P kann eine Antigen-Rückgewinnung mittels wärmeinduzierter Epitop-Rückgewinnung (HIER) in Citrat- oder EDTA-Puffer die Detektion verbessern; validieren Sie dies im entsprechenden ProbenSystem.
• Für IF/ICC sind Fixierung mit 4 % Paraformaldehyd und Permeabilisierung mit 0,1 % Triton X-100 typische Ausgangspunkte; Kern- und Zytoplasmafärbung sollten bewertet werden.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) bestätigen Sie die Fähigkeit des Antikörpers, endogene IGF2BP3-Komplexe herunterzuziehen; optimieren Sie die Stringenz des Lysepuffers, um Protein-Protein-Interaktionen zu erhalten.
• Die ELISA-Leistung kann im direkten oder Sandwich-Format bewertet werden; als polyklonaler Antikörper kann er sowohl als Erfassungs- als auch als Nachweisreagenz dienen, wenn er mit einem geeigneten monoklonalen Antikörper gepaart wird.
• Beachten Sie die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte, was auf konservierte Epitope hinweist; überprüfen Sie stets die Reaktivität in Ihrer Spezies von Interesse mit geeigneten Kontrollen.

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