Anti-IFNAR1 Kaninchen-poliklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17181

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IFNAR1

• IFNAR1 (Interferon-alpha/beta Rezeptor 1), auch bekannt als Zytokinrezeptor Klasse-II Mitglied 1 (CRF2-1), bildet gemeinsam mit IFNAR2 einen heterodimeren Rezeptor für Typ-I-Interferone (IFN-α, IFN-β, IFN-ε, IFN-ω und IFN-κ). Verwandte Referenzen: PMID:10049744, PMID:14532120, PMID:15337770

• Nach der Bindung von Interferon löst die Annäherung von IFNAR1 und IFNAR2 die Kreuzphosphorylierung assoziierter Janus-Kinasen (TYK2 an IFNAR1, JAK1 an IFNAR2), die Phosphorylierung von Rezeptor-Tyrosinresten, die Rekrutierung und Phosphorylierung von STAT-Transkriptionsfaktoren sowie deren nukleäre Translokation aus, um die Expression interferonstimulierter Gene zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:21854986, PMID:32972995, PMID:7665574, PMID:7526154, PMID:19561067

• IFNAR1 kann auch unabhängig von IFNAR2 als funktioneller Rezeptor für IFNB1 wirken und einen nicht JAK-STAT-abhängigen Signalweg aktivieren.

• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran, späte Endosomen und Lysosomen – was mit der Internalisierung und dem Trafficking des Rezeptors übereinstimmt.

• IFN-Rezeptoren werden ubiquitär exprimiert. Es gibt mehrere Isoformen: Isoform 1, 2 und 3 werden in IFN-empfindlichen Myelom-U266B1-Zellen nachgewiesen, während in IFN-resistenten U266R-Zellen nur die Isoformen 2 und 3 vorkommen.

• IFNAR1 gehört zur Familie der Klasse-II-Zytokinrezeptoren und verfügt über extrazelluläre Fibronectin-Typ-III-Wiederholungen sowie eine einzelne Transmembranhelix.

• Wichtige posttranslationale Modifikationen sind Glykosylierung, Palmitoylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung sowie die Bildung von Disulfid- und Isopeptidbindungen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen intrazellulären Domäne (AS 470–557), wodurch der Antikörper für Anwendungen wie Western Blotting (WB) und Immunhistochemie (IHC) geeignet ist, die Gesamt-IFNAR1 nachweisen – unabhängig von dem Abwurf der extrazellulären Domäne oder dem Glykosylierungszustand.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung erforderlich, damit der Antikörper Zugang zum intrazellulären Epitop erhält; Fügen Sie geeignete Negativkontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Als polyklonaler Antikörper kann er mehrere Epitope erkennen, was die Empfindlichkeit erhöht, aber potenziell auch den Hintergrund verstärkt; erwägen Sie die Optimierung von Blockierungs- und Waschbedingungen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-IFNAR1 ist bestätigt, dennoch sollte die Sequenzhomologie im Immunogenbereich überprüft werden; eine Validierung im entsprechenden Modellsystem wird empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen der Immunogenregion oder dem Volllängenprotein entspricht; ein Sandwich-ELISA-Format kann das Signal-Rausch-Verhältnis verbessern.
• Halten Sie Zell-/Gewebslysate und Reagenzien während der Präparation auf Eis, um den proteolytischen Abbau des ~64 kDa großen Zielproteins zu minimieren.

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