Anti-IFI30 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P13284

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IFI30-Funktion und -Lokalisierung

• IFI30 (GILT, IP30) ist ein durch Gamma-Interferon induzierbarer lysosomaler Thiolreduktase, der die Reduktion von Proteindisulfidbindungen katalysiert und eine kritische Rolle bei der Antigenverarbeitung und -präsentation für sowohl die MHC-Klasse-I- als auch die Klasse-II-Wege spielt. Verwandte Referenzen: PMID:10639150
• Das Enzym enthält eine redoxaktive CXXC-Motiv; die N-terminale Cysteine initiiert einen nukleophilen Angriff auf Substratdisulfidbindungen, bildet ein gemischtes Disulfid-Intermediat, das durch die zweite Cysteine gelöst wird, um das reduzierte Substrat und das oxidierte Enzym freizusetzen.
• IFI30 kann durch physiologische Reduktionsmittel wie lysosomales Cystein, Dithiothreitol und Cysteinylglycin, aber nicht durch Glutathion regeneriert werden, was den katalytischen Umsatz ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:10639150 PMID:10852914
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Lysosom und die Sekretion, was mit seiner Rolle bei der endozytischen Antigenverarbeitung übereinstimmt.
• Die Expression ist in antigenpräsentierenden Zellen konstitutiv, was ihre immunologische Relevanz unterstreicht.
• Das Protein ist ein Glykoprotein mit einem Signalpeptid und unterliegt einer proteolytischen Verarbeitung zu seiner reifen Form.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–250 und deckt den Großteil des IFI30-Polypeptids einschließlich der aktiven Stelle ab; dieses Design kann die Erkennung sowohl der Vorstufe als auch der reifen Form verbessern.
• Für den Western Blot sollten Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen in Betracht ziehen, um die Reduktion von Disulfidbindungen aufrechtzuerhalten; der Antikörper kann die ~28 kDa-Bande detektieren, die IFI30 entspricht.
• Für ELISA validieren Sie den Antikörper gegen das rekombinante Immunogen oder das native Protein in relevanten Probenmatrizes.

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