Anti-IDH3A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50213

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IDH3A-Funktion und -Lokalisierung

• IDH3A kodiert die Alpha-Untereinheit der mitochondrialen NAD-abhängigen Isocitrat-Dehydrogenase, einem Schlüsselenzym des Tricarbonsäurezyklus (TCA-Zyklus).
• Es katalysiert die oxidative Decarboxylierung von Isocitrat zu Alpha-Ketoglutarat, wobei NAD⁺ als Kofaktor genutzt wird und zweiwertige Metallionen (Mg²⁺/Mn²⁺) für die Aktivität erforderlich sind.
• Das Enzym fungiert als Heterotetramer: Zwei Alpha-Untereinheiten kombinieren sich mit einer Beta- (IDH3B) und einer Gamma-Untereinheit (IDH3G), um den voll aktiven Komplex zu bilden; Alpha/Beta- und Alpha/Gamma-Heterodimere zeigen eine basale Aktivität.
• Das Protein lokalisiert ausschließlich in der mitochondrialen Matrix, was seiner Rolle bei der Zellatmung entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Mutationen in IDH3A werden mit Retinitis pigmentosa in Verbindung gebracht, was die Bedeutung der Integrität des TCA-Zyklus für die Augengesundheit unterstreicht.
• Alternative Namen sind Isocitric dehydrogenase subunit alpha und NAD(+)-specific ICDH subunit alpha.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 28–366 von humanem IDH3A und deckt einen erheblichen Teil des reifen Proteins ab; es wird erwartet, dass der Antikörper sowohl endogenes als auch rekombinantes IDH3A nachweist.
• Für den Western Blot (WB) sollte ein Band bei ca. 40 kDa (vorhergesagtes Molekulargewicht 39,6 kDa) beobachtet werden; geeignete Positivkontrollen (z. B. HeLa, HEK293, Maus-/Ratten-Gewebeextrakte) einschließen.
• In der Immunhistochemie (IHC‑P) sollten die Bedingungen für die Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) optimiert und die Signalspezifität mit Blockierungspeptiden oder Knockout-Gewebe validiert werden.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) bestätigen Sie das mitochondriale Färbemuster mittels Co-Färbung mit einem mitochondriellen Marker; die Permeabilisierungsbedingungen erfordern möglicherweise eine Optimierung.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht translationale Studien; eine unabhängige Validierung im entsprechenden Probenystem wird empfohlen.
• Der Antikörper ist auch für ELISA-Anwendungen geeignet; die Kombination mit anderen IDH3A-Antikörpern kann die Entwicklung eines Sandwich-ELISA ermöglichen.

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