Anti-IDH1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75874

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IDH1-Funktion und -Lokalisierung

• IDH1 kodiert für zytoplasmatische Isocitrat-Dehydrogenase [NADP] (IDPc), die die NADP+-abhängige oxidative Decarboxylierung von Isocitrat zu 2-Oxoglutarat katalysiert, eine Reaktion, die von downstream-Enzymen wie Phytanoyl-CoA-Dioxygenase benötigt wird. Verwandte Referenzen: PMID:10521434 PMID:19935646
• Das Enzym erzeugt NADPH, einen kritischen Kofaktor für zahlreiche Biosynthesewege und die antioxidative Abwehr, was es mit dem zellulären Anabolismus und der Redox-Homöostase verbindet.
• IDH1 lokalisiert vorwiegend im Zytosol und in den Peroxisomen und kann auch als Hornhautepithel-Kristallin fungieren, um die Hornhauttransparenz zu erhalten (nach Ähnlichkeit).
• Es ist ein metallabhängiges Enzym, das Magnesium oder Mangan für die Aktivität benötigt, und unterliegt laut proteomischen Studien Acetylierung und Phosphorylierung.
• Als Schlüsselkomponente des Zitronensäurezyklus und des Glyoxylat-Bypass ist IDH1 am zentralen Kohlenhydratstoffwechsel beteiligt, wobei somatische Mutationen häufig in Gliomen und akuter myeloischer Leukämie gefunden werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich innerhalb der Aminosäuren 100–200, der bei Mensch, Maus, Ratte und Affe konserviert ist; dies unterstützt die berichtete breite Spezies-Kreuzreaktivität für Western Blotting (WB) und Immunfluoreszenz (IF/ICC).
• Für WB wird eine Bande um 47 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen und Ladekontrollen in Lysaten von IDH1-exprimierenden Zelllinien (z. B. HeLa, HepG2).
• Bei IF/ICC validieren Sie die Lokalisierungsmuster mit Organellmarkern, um die zytosolische und peroxisomale Färbung zu bestätigen, wie in der Literatur angegeben.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung des Beschichtungsantigens und der Antikörperverdünnung erfordern; ein direkter oder Sandwich-ELISA mit rekombinantem IDH1-Protein kann als Positivkontrolle verwendet werden.
• Beachten Sie, dass der Antikörper polyklonal ist und Chargenunterschiede aufweisen kann; eine konsistente Leistung sollte im relevanten experimentellen System überprüft werden.

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