Anti-ICOS/CD278 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6W8

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ICOS/CD278 Funktion und Lokalisierung

• ICOS (Induzierbarer T-Zell-Kostimulator), auch bekannt als AILIM und CD278, ist ein stimulatorischer Rezeptor, der auf aktivierten T-Zellen exprimiert wird. Er gehört zur CD28-Familie der Immun-Kostimulationsmoleküle und enthält eine Immunglobulindomäne.
• ICOS spielt eine entscheidende Rolle in T-Zell-Antworten durch Bindung an seinen Liganden ICOSL auf APZs, wodurch kostimulatorische Signale übermittelt werden, die die T-Zell-Proliferation, die Zytokinsekretion (z.B. IL10) und die Hilfe für die B-Zell-Antikörpersekretion verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:9930702, PMID:33033255
• Es ist entscheidend für die Differenzierung von T-follikulären regulatorischen Zellen während immunologischer Herausforderungen wie Virusinfektionen, wobei es über PI3K-Signalgebung und TCR-induzierte Calciumfluss-Modulation wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:27135603, PMID:30523347
• ICOS verhindert die Apoptose voraktivierter T-Zellen und ist essentiell für effiziente T-B-Zell-Interaktionen und CD40-vermittelten Klassenwechsel von Immunglobulin-Isotypen.
• Subzellulär ist ICOS in der Zellmembran lokalisiert und kann auch sezerniert werden.
• Es wird hoch in Tonsillen-T-Zellen in Keimzentren exprimiert, mit niedrigeren Leveln im Thymus, in der Lunge, in Lymphknoten und peripheren Blutzellen, was ein gewebespezifisches Expressionsmuster zeigt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die zu seiner strukturellen Stabilität beitragen.
• Alternatives Spleißen kann multiple Isoformen erzeugen, was funktionelle Diversität hinzufügt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 21-140) von humanem ICOS, die eine hohe Homologie mit Maus und Ratte aufweist, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot wird eine Bande um 23 kDa erwartet (manchmal als Doppelbande aufgrund von Glykosylierung); erwägen Sie die Verwendung von Positivkontroll-Lysaten aus aktivierten T-Zellen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC kann Permeabilisierung für den intrazellulären Nachweis erforderlich sein; validieren Sie die Färbung in T-Zelllinien wie Jurkat.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsantikörper verwendet werden; erwägen Sie die Paarung mit anderen ICOS-Antikörpern oder ICOSL-Fc-Fusionsproteinen.
• Schließen Sie immer geeignete Negativkontrollen (z.B. ICOS-defiziente Zellen oder Blockierpeptid) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Erwägen Sie, einen Bereich von Verdünnungen beginnend bei 1:500 für WB und 1:50 für IF zu testen, da polyklonale Antikörper zwischen Chargen variieren können.

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