Anti-ICAM3/CD50-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, FC – P32942

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ICAM3/CD50

• ICAM3 (CD50) ist ein Transmembran-Glykoprotein vom Typ I aus der Immunglobulin-Superfamilie, auch bekannt als CDw50 und ICAM-R.
• ICAM3 fungiert als Zelladhäsionsmolekül, indem es als Ligand für das Integrin LFA-1 (ITGAL/ITGB2) dient und dadurch die Leukozytenadhäsion, die Signalübertragung sowie die Phagozytose apoptotischer Neutrophiler durch Makrophagen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Es fungiert außerdem als Ligand für das Integrin ITGAD/ITGB2 und erweitert damit seine Rolle bei Interaktionen zwischen Immunzellen. Verwandte Referenzen: PMID:8777714
• ICAM3 bindet den dendritische-Zellen-spezifischen ICAM-3-bindenden Nicht-Integrin-Rezeptor (CD209) auf Ca2+-abhängige Weise und erleichtert dadurch anfängliche Kontakte zwischen dendritischen Zellen und T-Zellen, die Clusterbildung sowie die T-Zell-Proliferation. Verwandte Referenzen: PMID:10721994
• Das Protein wird konstitutiv auf der Oberfläche ruhender Leukozyten exprimiert, fehlt jedoch auf ruhenden oder durch Zytokine aktivierten Endothelzellen. Verwandte Referenzen: PMID:8325327 PMID:1448174
• ICAM3 wird phosphoryliert und glykosyliert; seine immunglobulinähnlichen Domänen werden durch Disulfidbindungen stabilisiert.
• Die vorhergesagte Molekülmasse beträgt etwa 59,5 kDa, wobei die Glykosylierung zu einem scheinbaren Gewicht von 60–85 kDa in der SDS-PAGE führt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen extrazellulären Region (AS 30–114) des humanen ICAM3 und umfasst die Ligandenbindungsdomäne; dieses Design kann die Erkennung funktionell relevanter Epitope begünstigen.
• Bei Western Blotting sollte die Detektion in Leukozytenlysaten validiert werden; aufgrund variabler Glykosylierung ist eine Bande im Bereich von etwa 60–85 kDa zu erwarten.
• Für die Immunhistochemie sollten eine Antigenrückgewinnung in Betracht gezogen und geeignete Positivkontrollen, beispielsweise Tonsil- oder Lymphknotengewebe, einbezogen werden.
• Verwenden Sie bei der Durchflusszytometrie lebende, nicht permeabilisierte Leukozyten, um die Oberflächenexpression zu detektieren, und titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.
• Für Immunfluoreszenz und Immunzytochemie sollten die Zellen angemessen fixiert und permeabilisiert sowie die Lokalisation an der Plasmamembran bestätigt werden.

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