Anti-ICAM-1/CD54-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, FC, ELISA – Q00238

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ICAM-1/CD54

• ICAM-1 (CD54) ist ein Transmembran-Glykoprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie und fungiert als Zelladhäsionsmolekül.
• Es dient als Ligand für die Integrine LFA-1 (ITGAL:ITGB2) und MAC-1 (ITGAM:ITGB2) und vermittelt die Adhäsion von Leukozyten an Endothelzellen sowie die transendotheliale Migration.
• Während der Extravasation von Leukozyten stimuliert die Bindung von ICAM-1 über die Aktivierung von ARHGEF26/SGEF und RHOG den Aufbau apikaler Endothelzell-Cups.
• In Epithelzellen fördert die Interaktion von ICAM-1 mit MUC1 die Zellaggregation.
• ICAM-1 ist in der Zellmembran lokalisiert und weist mehrere immunglobulinähnliche Domänen, ein Signalpeptid und eine Transmembranhelix auf.
• Das Protein durchläuft posttranslationale Modifikationen, darunter N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und Funktion regulieren können.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (AS 28–493) von Ratten-ICAM-1 und umfasst mehrere immunglobulinähnliche Domänen. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper möglicherweise die native extrazelluläre Konformation erkennt. Berücksichtigen Sie dies bei Anwendungen, die die Erkennung der nativen Struktur erfordern (z. B. FC, ELISA).
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 60 kDa. Überprüfen Sie die Bandspezifität anhand geeigneter Lysate und Ladekontrollen.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) die Antigenrückgewinnungsmethoden, da ICAM-1 ein Membranprotein ist. Validieren Sie die Färbung in relevanten Rattengeweben, von denen bekannt ist, dass sie ICAM-1 exprimieren (z. B. Endothel, entzündetes Gewebe).
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie (FC) eine indirekte Färbung mit geeigneten Sekundärantikörpern. Bestätigen Sie die Reaktivität mit Rattenzelllinien oder Primärzellen.
• ELISA-Anwendungen können von einer Titration sowohl der Fang- als auch der Detektionsantikörper profitieren, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Eine Kreuzreaktivität wurde für Ratte berichtet. Bei Verwendung anderer Spezies sollte die Reaktivität durch Sequenzalignment und Pilotexperimente validiert werden.

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