Polyklonaler Anti-HUWE1-Antikörper für WB und ELISA – Q7Z6Z7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HUWE1

• HUWE1 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die Proteine durch Polyubiquitinierung für den proteasomalen Abbau markiert, darunter MCL1, p53/TP53, Kernhistone, MYCN, CDC6, NR1D1 und MFN2 (PubMed:15567145, PubMed:15767685, PubMed:15989957, PubMed:15989956, PubMed:18488021, PubMed:17567951, PubMed:20534529, PubMed:26214738). Zugehörige Referenzen: PMID:15567145 PMID:15767685 PMID:15989957 PMID:15989956 PMID:18488021 PMID:17567951 PMID:20534529 PMID:26214738
• Es reguliert die Apoptose durch Polyubiquitinierung und Abbau von MCL1, einem antiapoptotischen Mitglied der BCL2-Familie (PubMed:15989957). Zugehörige Referenzen: PMID:15989957
• HUWE1 monoubiquitiniert die DNA-Polymerase beta (POLB) an mehreren Lysinresten, was auf eine Beteiligung an der Basenexzisionsreparatur hinweist (PubMed:19713937). Zugehörige Referenzen: PMID:19713937
• Es fungiert als Ubiquitin-Ligase für Kernhistone (H1, H2A, H2B, H3, H4) und ist damit an der Chromatinregulation beteiligt (PubMed:15567145, PubMed:15767685, PubMed:15989956). Zugehörige Referenzen: PMID:15567145 PMID:15767685 PMID:15989956
• HUWE1 befindet sich im Zytoplasma, im Zellkern und in den Mitochondrien, was mit seinen vielfältigen Substraten und Funktionen übereinstimmt.
• Es ist an der Regulation der JNK- und NF-kappa-B-Signalwege beteiligt, indem es verzweigte Ubiquitinketten auf Substraten zusammensetzt und K63-verknüpfte Ketten vor der Deubiquitinierung schützt (PubMed:27746020). Zugehörige Referenzen: PMID:27746020
• Das Protein wird schwach im Herzen, im Gehirn und in der Plazenta exprimiert und findet sich überwiegend in Zelllinien kolorektaler Karzinome. Es ist an der neuronalen Differenzierung, zirkadianen Rhythmen und der mitochondrialen Dynamik beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen Aminosäuren 1–100 des humanen HUWE1. Bei der Verwendung von Rattenproben sollte die Sequenzhomologie in diesem Bereich überprüft werden, um die Reaktivität sicherzustellen.
• Beim Western Blot sollte aufgrund des hohen Molekulargewichts (~482 kDa) ein Acrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 %) und verlängerten Transferzeiten in Betracht gezogen werden, um die Detektion zu verbessern.
• ELISA kann zum Nachweis von HUWE1 in Zell- oder Gewebelysaten eingesetzt werden; die Assay-Bedingungen sollten in Ihrem spezifischen experimentellen System validiert werden.
• Der Antikörper wird als polyklonales Kaninchen-IgG geliefert; für Spezifitätskontrollen können eine Vorabsorption oder blockierende Peptide in Betracht gezogen werden.

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