Anti-HuR/ELAVL1 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15717

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: HuR/ELAVL1 Funktion und Lokalisation

• HuR/ELAVL1 ist ein RNA-bindendes Protein, das spezifisch AU-reiche Elemente (AREs) und Poly-U-Motive in den 3'-UTRs von mRNAs wie FOS und IL3 erkennt, diese stabilisiert und ihre Translation verstärkt. Es bindet bevorzugt die 5'-UUUU[AG]UUU-3'-Sequenz. Verwandte Referenzen: PMID:14517288, PMID:18285462, PMID:31358969, PMID:14731398, PMID:17632515, PMID:8626503
• Während der Differenzierung embryonaler Stammzellen bindet HuR bevorzugt nicht-m6A-methylierte mRNAs, stabilisiert diese und fördert so das Differenzierungsprogramm (Durch Ähnlichkeit).
• HuR bindet auch m6A-modifizierte MYC-mRNA und trägt zur Stabilität des MYC-Onkogens und der Proliferationskapazität bei (PubMed:32245947). Verwandte Referenzen: PMID:32245947
• Es erhöht die Stabilität der Leptin-mRNA durch ARE-Bindung und verbindet es so mit dem Energiestoffwechsel (PubMed:29180010). Verwandte Referenzen: PMID:29180010
• HuR shuttle zwischen Kern und Zytoplasma und lokalisiert als Reaktion auf zellulären Stress in Stressgranula und P-Körperchen.
• Es wird ubiquär exprimiert und ist im Gehirn, Leber, Thymus und Muskel nachweisbar.
• Posttranslationelle Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Methylierung regulieren die Funktion und subzelluläre Verteilung von HuR.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Verwenden Sie für WB Ganzzelllysate aus HuR-exprimierenden menschlichen oder murinen Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293). Die erwartete Bandgröße beträgt ca. 36 kDa. Erwägen Sie eine Präabsorption mit dem immunisierenden Peptid zur Spezifitätsbestätigung.
• Für IHC-P validieren Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen (Citrat- oder EDTA-Puffer) in menschlichen oder murinen Gewebeschnitten, die bekanntermaßen HuR exprimieren, wie z. B. Gehirn oder Leber. Ein Blockierungsschritt wird empfohlen, um Hintergrund zu reduzieren.
• Für IF/ICC optimieren Sie Fixierungs- (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierungsprotokolle (z. B. 0,1 % Triton X-100). Das Kern-Zytoplasma-Shuttling von HuR kann durch Zellbehandlung beeinflusst werden; schließen Sie unbehandelte Kontrollen ein.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl für direkte als auch für Sandwich-Formate verwendet werden. Kombinieren Sie ihn mit einem Nachweisantikörper, der ein entferntes Epitop erkennt, für optimale Sensitivität.
• Da HuR posttranslationellen Modifikationen unterliegt, berücksichtigen Sie den biologischen Kontext bei der Interpretation von Ergebnissen; modifizierte Formen können auf SDS-PAGE anders wandern.

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