Anti-Huntingtin Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42858

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Huntingtin-Funktion und -Lokalisierung

• Das Huntingtin-(HTT)-Protein, auch bekannt als HD-Protein oder IT15, wird vom HTT-Gen kodiert und ist der primäre Schwerpunkt der Huntington-Krankheitsforschung.
• Huntingtin ist ein großes 348 kDa Protein, das eine Rolle beim mikrotubulvermittelten Transport oder der Vesikelfunktion spielen könnte.
• Es fördert die Bildung autophager Vesikel und trägt zu zellulären Abbaupfaden und Recyclingwegen bei.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Zytoplasma, den Zellkern, das frühe Endosom und die Autophagosomen, was auf einen dynamischen Trafficking-Prozess hindeutet.
• Im Gehirn wird Huntingtin stark im Großhirnrinde, Striatum, Kleinhirnrinde und der hippocampalen Formation exprimiert; es ist auch in Nervenfasern, Varikositäten und Nervenenden zu finden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Myristoylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktion und Wechselwirkungen regulieren können.
• Mutationen im HTT-Gen, die eine Expansion von CAG-Tripletts wiederholen, verursachen die Huntington-Krankheit, eine neurodegenerative Störung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den aa 435-635 des humanen Huntingtin (NP_002102.4). Für Western Blots beachten Sie das hohe Molekulargewicht (~348 kDa); erwägen Sie die Verwendung von Polyacrylamidgelen mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten für eine optimale Detektion.
• Als polyklonaler Antikörper kann er mehrere Epitope erkennen; dies kann vorteilhaft für die Detektion von vollständigen und truncierten Huntingtin-Spezies sein, aber eine spezifische Validierung wird für jede Anwendung empfohlen.
• Für IHC-P und IF/ICC verwenden Sie frischgefrorene oder in Paraffin eingebettete Gehirnschnitte als Positivkontrolle, angesichts der hohen Expression im zentralen Nervensystem. Validieren Sie das Färbemuster gegenüber bekannten subzellulären Verteilungen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Rattenproben, aber die Antigenexpressionsniveaus und die Proteinstabilität können zwischen Geweben und Spezies variieren; führen Sie Pilotexperimente durch, um die Eignung zu bestätigen.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungsantigene und die Antikörperverdünnung, um einen linearen Detektionsbereich zu erreichen.
• Fügen Sie immer Negativkontrollen ein (z. B. Gewebe von HTT-Knockout-Modellen, falls verfügbar) und verifizieren Sie die Spezifität mit bekannten positiven und negativen Lysaten.

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