Anti-Huntingtin monoklonaler Antikörper für WB, IF-F, ELISA – P42858

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Huntingtin

• Huntingtin, auch Huntington-Krankheit-Protein (HD-Protein) genannt, wird vom HTT-Gen kodiert (auch als HD oder IT15 bezeichnet) und ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen im Gehirn.
• Es handelt sich um ein großes ~348 kDa großes Protein, das eine Rolle beim mikrotubulvermittelten Transport und bei der Vesikelfunktion spielen kann und die Bildung autophager Vesikel fördert.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern, frühe Endosomen und Autophagosomen, was seine Beteiligung an intrazellulärem Transport und Autophagie widerspiegelt.
• Im Gehirn kommt Huntingtin besonders häufig in der Kleinhirnrinde, Neocortex, Striatum und Hippocampusformation vor und lokalisiert an Nervenfasern, Varikositäten und Nervenendigungen.
• Mutationen mit einer CAG-Triplettwiederholungsexpansion im HTT-Gen führen zur Huntington-Krankheit, einer autosomal-dominanten neurodegenerativen Erkrankung, die durch motorische, kognitive und psychiatrische Symptome gekennzeichnet ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Myristoylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Funktion und Interaktionen regulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Als monoklonaler Kaninchen-Antikörper bietet er hohe Spezifität und Charge-zu-Charge-Konsistenz für reproduzierbare Ergebnisse.
• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid im N-terminalen Bereich (AS 1-100), was die Erkennung des volllängen Huntingtin-Proteins gewährleistet.
• Verwenden Sie für Western Blot ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6-8%), um das große ~348 kDa-Protein aufzutrennen; überprüfen Sie die Transfereffizienz mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern.
• Dieser Antikörper ist als KO validiert angegeben, was die Spezifität bestätigt; erwägen Sie die Einbeziehung geeigneter Knockout- oder Knockdown-Kontrollen in Ihre Experimente.
• Für die Immunfluoreszenz kann die Optimierung von Fixierung (z. B. 4% PFA) und Permeabilisierung (z. B. 0,1% Triton X-100) die Erkennung von Huntingtin in zytoplasmatischen und nukleären Kompartimenten verbessern.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in Ihren spezifischen Proben, da die Spezieskreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte) auf Lieferantendaten basiert; testen Sie unter Ihren experimentellen Bedingungen.
• Für ELISA-Anwendungen kann eine Paarung mit einem Capture- oder Detektionsantikörper erforderlich sein; bewerten Sie verschiedene Kombinationen und Beschichtungsbedingungen.

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