Anti-Human-/Affen-CD8a-monoklonaler Antikörper für FC – P01732

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8a

• CD8A ist ein Transmembran-Glykoprotein vom Typ I mit einem Molekulargewicht von etwa 25,7 kDa, auch bekannt als Leu-2 oder T8/Leu-2, und gehört zur Immunglobulin-Superfamilie. Aufgrund alternativen Spleißens existieren mehrere Isoformen.
• Es fungiert als Korezeptor für den T-Zell-Rezeptor (TCR), indem es an MHC-Klasse-I-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen bindet, und ist entscheidend für die thymische T-Zell-Selektion sowie die periphere Immunüberwachung.
• Nach der TCR-Bindung assoziiert der zytoplasmatische Teil von CD8A mit der Src-Familienkinase LCK und initiiert Signalkaskaden, die Zytokinproduktion, Zytotoxizität und T-Zell-Proliferation auslösen.
• In zytotoxischen T-Lymphozyten (CTLs) ermöglicht die Interaktion von CD8A mit MHC-Klasse I die Erkennung und Eliminierung virusinfizierter Zellen und Tumorzellen.
• CD8A kann auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) auch Homodimere bilden und dadurch die Bildung von Zellkonjugaten, die Lyse von Zielzellen und Überlebenssignale fördern.
• Wird überwiegend auf der Oberfläche von CD8+-T-Zellen als Heterodimer mit CD8B exprimiert; Homodimere finden sich in Teilpopulationen von NK-Zellen, Gedächtnis-T-Zellen, intraepithelialen Lymphozyten, Monozyten und dendritischen Zellen.
• Subzelluläre Lokalisation: hauptsächlich Plasmamembran; nach Aktivierung auch als lösliche Form sezerniert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Palmitoylierung, die die Proteinfaltung und Verankerung in der Membran beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 22–182) des humanen CD8A, die voraussichtlich die reife, an der Zelloberfläche exponierte Form des Rezeptors erkennt.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für den jeweiligen Zelltyp zu bestimmen.
• Geeignete Isotypkontrollen einschließen und eine Blockierung von Fc-Rezeptoren in Betracht ziehen, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Die Kreuzreaktivität mit CD8a des Javaneraffen in den jeweiligen biologischen Kontexten validieren.
• Beachten Sie, dass CD8a-Homodimere auf NK-Zellen möglicherweise andere Färbebedingungen erfordern als Heterodimere auf T-Zellen.

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