Anti-Human TrkA Monoklonaler Antikörper () für Durchflusszytometrie - P04629

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TrkA/NTRK1 Funktion und Lokalisierung

• TrkA (hochaffiner Nervenwachstumsfaktor-Rezeptor) ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die NGF als primären Liganden bindet, nach Ligandenbindung eine Homodimerisierung und Autophosphorylierung eingeht und nachgeschaltete Signalkaskaden einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:1281417
• Der Rezeptor ist entscheidend für die Entwicklung, Reifung und das Überleben von sympathischen und sensorischen Neuronen, indem er Proliferation, Differenzierung und Apoptose über unterschiedliche Signalwege reguliert.
• Nach Aktivierung rekrutiert und phosphoryliert TrkA Adapterproteine wie SHC1, FRS2, SH2B1, SH2B2 und PLCG1, was zur Aktivierung der Ras-MAPK-, PI3K-AKT- und NF-κB-Wege führt, die das Zellüberleben und die Differenzierung steuern. Verwandte Referenzen: PMID:15488758, PMID:17196528
• Alternatives Spleißen erzeugt drei Isoformen: TrkA-I (weitgehend in nicht-neuronalen Geweben exprimiert), TrkA-II (hauptsächlich in neuronalen Zellen) und TrkA-III (spezifisch für neurale Stammzellen und Neuralleisten-Vorläuferzellen), die bei Überexpression onkogene Aktivität zeigt.
• TrkA lokalisiert hauptsächlich an der Zellmembran und zirkuliert durch frühe, späte und rezyklierende Endosomen, was seiner Rolle beim Rezeptor-Trafficking und der Signalmodulation entspricht.
• Der Rezeptor enthält charakteristische strukturelle Motive, einschließlich immunglobulinartiger Domänen, Leucin-reicher Wiederholungen und einer Tyrosinkinase-Domäne, und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 33–407) von humanem TrkA, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop in der Ligandenbindungsregion erkennt und potenziell zur Detektion sowohl membrangebundener als auch internalisierter Rezeptorpopulationen geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) wird empfohlen, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollzelllinien (z. B. TrkA-exprimierende neuronale oder Krebszelllinien), um die Färbungsspezifität zu validieren.
• Wenn Sie die gesamten Rezeptorspiegel (Oberfläche plus intrazellulär) detektieren, fügen Sie einen Permeabilisierungsschritt hinzu; für eine reine Oberflächendetektion verwenden Sie ein nicht-permeabilisierendes Protokoll.

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