Anti-Human SIGLEC9 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q9Y336

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SIGLEC9

• SIGLEC9 (Sialinsäure-bindendes Ig-ähnliches Lektin 9) ist auch bekannt als CD329, CDw329 oder Protein FOAP-9. Es gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und zur Familie der Sialinsäure-bindenden Lektine (Siglecs).
• Funktionell wirkt SIGLEC9 als vermeintliches Adhäsionsmolekül, das eine sialinsäureabhängige Bindung an Zellen vermittelt. Es bindet bevorzugt alpha-2,3- oder alpha-2,6-verknüpfte Sialinsäuren.
• Die Sialinsäure-Erkennungsstelle von SIGLEC9 kann durch cis-Wechselwirkungen mit Sialinsäuren auf der gleichen Zelloberfläche maskiert werden, was die Bindungsaktivität regulieren kann.
• SIGLEC9 ist ein einfach passendes Typ-I-Membranprotein, das an der Plasmamembran lokalisiert ist.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in periphären Blutleukozyten, insbesondere Neutrophilen und Monozyten; sie wird auch in Leber, fetaler Leber, Knochenmark, Plazenta und Milz nachgewiesen. Niedrigere Konzentrationen finden sich in verschiedenen anderen Geweben.
• Das Protein enthält zwei Immunglobulin-ähnliche Domänen (eine V-Satz- und eine C2-Satz-Domäne), eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz. Es unterliegt alternatives Spleißen und ist glykosyliert.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierung. Die molekulare Masse der kanonischen Isoform beträgt etwa 50 kDa, zusätzliche Isoformen können bei ~52 kDa nachgewiesen werden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 18–348 von menschlichem SIGLEC9 und deckt die gesamte extrazelluläre Domäne ab. Dieses Design generiert in der Regel Antikörper, die natives membrangebundenes SIGLEC9 erkennen.
• Titrieren Sie den Antikörper für die Durchflusszytometrie, um die optimale Konzentration für Ihren Probentyp zu bestimmen. Fügen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und eine Lebend/Tot-Färbung hinzu, um die Spezifität zu gewährleisten.
• Da SIGLEC9 cis-Wechselwirkungen mit Zelloberflächen-Sialinsäuren eingehen kann, kann das Antikörperepitop auf intakten Zellen teilweise maskiert sein. Wenn eine schwache Färbung beobachtet wird, erwägen Sie eine Behandlung der Zellen mit Neuraminidase (Sialidase) oder die Verwendung von Säurewaschbedingungen, um die cis-Bindung zu stören und den Zugang des Antikörpers zu verbessern.
• Das -Konjugat liefert ein helles und fotostabiles Signal, das für mehrfarbige durchflusszytometrische Panels geeignet ist. Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen und schützen Sie es vor Licht, um die Integrität des Konjugats zu erhalten.

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