Monoklonaler Anti-human-Podoplanin-Antikörper () für die Durchflusszytometrie – Q86YL7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Podoplanin

• Podoplanin (PDPN, Aggrus, Gp36, T1A) ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein mit mehreren durch alternatives Spleißen erzeugten Isoformen im Bereich von etwa 12 bis 24 kDa. Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört eine umfangreiche Sialinsäure-Anlagerung.
• PDPN vermittelt durch die Interaktion mit CLEC1B die Aktivierung und Aggregation von Thrombozyten, was während der Entwicklung eine entscheidende Rolle bei der Trennung von Blut- und Lymphgefäßen spielt. Dieser Effekt wird durch die Bindung an CD9 antagonisiert, wodurch die Thrombozytenaggregation abgeschwächt wird.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:14522983
  PMID:15231832
  PMID:17222411
  PMID:18541721
• Durch Interaktionen mit ERM-Proteinen (MSN, EZR) fördert PDPN den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT), aktiviert RHOA und steigert die Zellmigration sowie die Invasivität.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:17046996
  PMID:21376833
• In Epithel- und Tumorzellen bewirkt die Bindung von PDPN an CD44 eine gerichtete Zellmigration, während die Interaktion mit LGALS8 möglicherweise das lymphatische Endothel mit der extrazellulären Matrix verbindet.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:20962267
  PMID:19268462
• In Keratinozyten induziert eine Überexpression von PDPN eine verlängerte Zellmorphologie, eine Reorganisation des Aktins, eine erhöhte Beweglichkeit und eine verringerte Adhäsion.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:15515019
• PDPN ist an der Plasmamembran und an Membranfortsätzen lokalisiert, darunter Lamellipodien, Filopodien, Mikrovilli, Membrankräuselungen und Invadopodien, sowie in Membran-Rafts, apikalen/basolateralen Domänen und im Zytosol. In Invadopodien reguliert PDPN den Abbau der extrazellulären Matrix durch Aktivierung der RHOC-ROCK-LIMK-CFL1-Signalkaskade.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:25486435
• PDPN wird stark in Plazenta, Lunge, Skelettmuskulatur und Gehirn sowie schwach in Niere und Leber exprimiert. In kolorektalen Tumoren und frühen oralen Plattenepithelkarzinomen ist es hochreguliert, was auf eine Rolle bei der Tumorprogression hindeutet.
• Trotz früherer Hypothesen fungiert PDPN weder als Wasserkanal noch reguliert es Wasserkanäle vom Aquaporin-Typ; ebenso beeinflusst es weder den Folat- noch den Aminosäuretransport.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:9651190

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre N-terminale Region (Aminosäuren 21–123), wodurch sich dieser Antikörper für die Färbung von membrangebundenem Podoplanin in der Durchflusszytometrie an lebenden, nicht permeabilisierten Zellen eignet.
• Da Podoplanin stark glykosyliert ist, sollte sichergestellt werden, dass rekombinante oder native Antigenquellen ihre nativen posttranslationalen Modifikationen bewahren, um eine optimale Antikörpererkennung zu gewährleisten.
• Das ABflo®-647-Konjugat emittiert im tiefroten Spektralbereich (~647 nm) und eignet sich ideal für mehrfarbige Durchflusszytometrie-Panels. Validieren Sie die Kompensationseinstellungen und die Antikörpertitration in Ihrem experimentellen System.
• Fügen Sie jedem Experiment geeignete Isotypkontrollen hinzu und bestätigen Sie die Reaktivität in Podoplanin-positiven Zelltypen wie lymphatischen Endothelzellen oder Tumorzelllinien.

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