Anti-Human LILRA2/CD85h monoklonaler Antikörper für IF/ICC, FC - Q8N149

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LILRA2/CD85h Funktion und Lokalisierung

• LILRA2 (Leukozyten-Immunoglobulin-ähnlicher Rezeptor, Unterfamilie A, Mitglied 2), auch als CD85h, ILT-1 und LIR-7 bezeichnet, ist ein Single-Pass Typ I Membranprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie. Mehrere Proteinisoformen werden durch alternatives Spleißen gebildet, mit berichteten Molekulargewichten von etwa 47–53 kDa.
• Als angeborener Immunrezeptor erkennt LILRA2 spezifisch N-terminal verkürzte Immunglobuline, die durch proteolytische Spaltung durch verschiedene pathogene Bakterien und Pilze entstehen, einschließlich L. pneumophila, M. hyorhinis, S. pneumoniae, S. aureus und C. albicans. Diese Erkennung löst die Aktivierung von Neutrophilen und die Freisetzung von Entzündungsmediatoren aus Monozyten und Eosinophilen aus. Verwandte Referenzen: PMID:12529506 PMID:27572839 PMID:22479404
• Der Rezeptor bindet eine Untergruppe gespaltener IgM-, IgG3- und IgG4-Moleküle, interagiert jedoch nicht mit gespaltenem IgA1 oder Klasse-I-MHC-Antigenen, was auf eine Spezifität für bestimmte durch Pathogene modifizierte Immunglobuline hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:27572839 PMID:19230061
• Nach Ligandenbindung in Monozyten reguliert LILRA2 die Reaktionen auf bakterielles Lipopolysaccharid (LPS) herunter, wahrscheinlich durch Verringerung der TLR4-Expression und -Signalübertragung, und induziert die Sekretion von CSF2, CF3, IL6, CXCL8 und CCL3. Verwandte Referenzen: PMID:22479404
• In Eosinophilen fördert die Rezeptoraktivierung die Freisetzung von RNASE2, IL4 und Leukotrien C4 und verstärkt so weitere Entzündungskaskaden. Verwandte Referenzen: PMID:12529506
• LILRA2 wird hauptsächlich auf der Oberfläche von peripheren Blutmonozyten, Neutrophilen, Basophilen und Eosinophilen nachgewiesen, mit sehr geringer oder fehlender Expression auf T-Zellen, B-Zellen, dendritischen Zellen und NK-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:12529506 PMID:22479404 PMID:9548455
• Dem Protein werden mehrere wichtige strukturelle und funktionelle Merkmale zugeordnet, darunter ein Signalpeptid, Immunglobulin-ähnliche Domänen, Disulfidbindungen, N-gebundene Glykosylierung und Tyrosinnitrierung; eine sekretierte Isoform wurde ebenfalls beschrieben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen die gesamte extrazelluläre Region abdeckt, erkennt der Antikörper wahrscheinlich natives, an der Oberfläche exprimiertes LILRA2, was ihn für die Lebendzellfärbung in der Durchflusszytometrie und Immunfluoreszenz geeignet macht.
• Für IF/ICC sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die Zugänglichkeit des Epitops zu erhalten, insbesondere für den intrazellulären oder membrangebundenen Nachweis.
• Angesichts des berichteten Expressionsprofils sollten geeignete Kontrollen unter Verwendung von Zelltypen mit bekannter Expression (z. B. periphere Blutmonozyten, Neutrophile) und solchen mit geringer/fehlender Expression (z. B. Lymphozyten) eingeschlossen werden, um die Spezifität zu überprüfen.
• Der konjugierte -Fluorophor ist mit Standard-Rotfluoreszenz-Detektionskanälen kompatibel; während der Verarbeitung stets vor Licht schützen.
• Für FC sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Probentyp zu ermitteln, um den Hintergrund zu minimieren und das Signal-Rausch-Verhältnis zu maximieren.
• Da der Antikörper vom Anbieter nur für IF/ICC und FC validiert ist, sollte die Leistung in anderen Anwendungen (z. B. Western Blotting) unabhängig überprüft werden, insbesondere angesichts der multiplen Isoformen und potenziellen Glykosylierung von LILRA2.

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